【摘 要】
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根据反义RNA技术的原理,将多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG)基因反向克隆到植物表达载体pBI151上,构建具有反义PG基因的植物表达载体.通过酶切鉴定和Agarose gel电泳
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根据反义RNA技术的原理,将多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG)基因反向克隆到植物表达载体pBI151上,构建具有反义PG基因的植物表达载体.通过酶切鉴定和Agarose gel电泳检测发现,所获得的重组质粒中PG基因DNA片段已完整地反向插入到pBI151的SmaI位点上,其上游有CaMV35Sp,下游有NOS<,T>通过.农杆菌介导转化法将反义PG基因和NPTⅡ基因导入番茄叶盘.在含有卡那霉素100μg/ml和羧苄青霉素500μg/ml的抗性培养基上,经共培养的叶盘长出具有Kan抗性表型的愈伤组织,并再生出完整植株.通过NPTⅡ检测证实NPTⅡ基因已在再生植株中稳定,Southern blot检测亦证明反义PG基因已整合到番茄再生植株的核基因组中.
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