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黄芩苷（baicalin）具有清热镇静、抑菌抗炎等作用。本实验通过对热应激下SCs添加不同浓度黄芩苷探讨黄芩苷是否可以提高热应激下 SCs的存活率以及提高SCs干细胞因子（SCF）和胶质细胞源性神经生长因子（GDNF）的表达，并且探讨其是通过什么途径提高细胞抗凋亡作用。试验一，采用二步酶消化法分离睾丸组织，4h差速贴壁纯化获得睾丸支持细胞，分别用RT-PCR鉴定标志性基因SCF和GDNF的表达，免疫组化染色检测FasL表达，福尔根染色（Feulgen）鉴定细胞形态。试验二，选用第三代对数生长期的SCs，通过MTT筛选黄芩苷安全使用浓度；设对照组（34℃），热应激组（43℃），热应激加黄芩苷（0.1，1，10和20μg/ml）组；用 MTT检测细胞存活率（A值），提取各组细胞总RNA和总蛋白，分别用实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）和酶联免疫吸附测定（ELISA）检测SCF和GDNF mRNA及其蛋白的表达。试验三，流式细胞仪检测热应激下细胞凋亡率。分别用qRT-PCR和Western blot检测Fas，FasL，caspase8和3以及Hsp72 mRNA和蛋白的表达。Caspase3活性试剂盒检测caspase3的活性。 结果显示，试验一：第三代原代细胞生长良好，RT-PCR检测可见SCF与GDNF mRNA表达，特异性蛋白FasL表达明显，福尔根染色显示有卫星核小体存在，表明分离培养的细胞为睾丸支持细胞。试验二：对第三代SCs进行热应激处理，与对照组比较，43℃热应激组细胞存活率极显著(P<0.01)降低，SCF与GDNF mRNA与蛋白的表达显著降低。添加不同浓度黄芩苷（0.1,1,10,20μg/ml）后，与43℃热应激组比较，细胞的存活率显著升高，SCF和GDNF mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)的表达量均显著升高。试验三：43℃热应激通过激活Fas/FasL凋亡路径并激活下游caspase3诱导细胞发生凋亡。添加不同浓度黄芩苷（0.1,1,10,20μg/ml）后发现，与43℃热应激组相比，细胞凋亡率极显著降低（P<0.01），Fas，FasL，caspases8和3 mRNA表达显著下降，Fas，FasL蛋白表达量显著下降，pro-caspases8和3蛋白表达量显著增高。Hsp72 mRNA与蛋白表达显著增高，在浓度1μg/ml黄芩苷热应激组Hsp72 mRNA水平极显著增高(P<0.01)，在浓度10μg/ml的黄芩苷热应激组Hsp72蛋白表达水平呈极显著增高（P<0.01）。 本实验发现，热应激诱导睾丸支持细胞发生凋亡，降低其SCF和GDNF的表达。添加黄芩苷能提高热应激下睾丸支持细胞的存活率以及SCF和GDNF的表达量，可通过调节Fas/FasL凋亡通路，caspase3活性以及Hsp72表达提高SCs抗凋亡能力。