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真菌毒素在谷物的存储过程中极易造成污染,影响谷物品质,严重危害人类的健康。目前真菌毒素的检测方法较多,但是存在成本高、样品前处理复杂等缺点。本文是基于结构转换信号适配体光子晶体微球液相芯片技术建立的一套谷物中多种真菌毒素的检测方法,具有检测成本低、高通量检测等优点。本文研究的内容主要包括二氧化硅光子晶体微球的自组装;光子晶体微球的表征;微球表面的化学修饰;真菌毒素的单组分检测的条件优化、标准曲线的建立和回收率的测定;谷物中的真菌毒素的多重检测的条件优化、多重标准曲线的建立和多重回收率的测定;用传统ELISA方法检测谷物中真菌毒素的回收率。具体工作如下:1.用实验室自制平台,采用自组装的方式制备三种不同二氧化硅光子晶体微球并进行表征研究,并对微球进行不同化学修饰的对比,结果显示羧基的背景信号最低,且表面结合位点最多,与适配体结合效率最强。2.利用表面羧基修饰过的光子晶体微球作为载体,进行AFB1、FB1、OTA的单组分检测,并对检测过程中的条件进行优化,优化最适条件为:AFB1-apta mer浓度为800 nmol/L,其互补链浓度为2400 nmol/L,杂交条件为37℃、1h,毒素结合条件为37℃、1.5h。OTA-aptamer浓度为600 nmol/L,其互补链浓度为3000 nmol/L,杂交条件为 37℃、1h,毒素结合条件为 45℃、1h。FB1-aptamer浓度为800nmol/L,其互补链浓度为3200 nmol/L,杂交最优条件37℃、1h,毒素结合的最优条件为45℃、1h。根据上述最优条件,建立AFB1的标准曲线,其线性范围为 0.001-1ng/mL,y=846.83434x+3356.83023(R2=0.99294);OTA 标准曲线线性范围 0.01-10ng/mL,y=1962.2397x+9573.46534(R2=0.99149);FB1准曲线线性范围 0.001-1ng/mL,y=612.67559x+2591.61248(R2=0.9898)。对 AFB1 的特异性进行研究结果显示,AFB1-aptamer特异性强,与其类似物无明显交叉反应。在三种谷物(大米、小麦、玉米)中加入AFB1的标准品测定回收率,回收率范围为76.84±4.14%～112.77±3.80%,说明本方法测得的回收率有效。3.在单组分检测的基础上,进行真菌毒素的多重检测,多重检测毒素结合的最优条件为:45℃、1.5h。根据最优条件建立多重标准曲线,AFB1的线性范围为 0.0001-0.1ng/mL,y=548.87374x+4195.94847(R2=0.99024);OTA 的线性范围为 0.0001-O.1ng/mL,y=582.946x+2399.90(R2=0.99789);FB1的线性范围为 0.1-1 Ong/mL,y=620.8157x+2654.2092(R2=0.99967)。对三种谷物进行多重回收率检测,AFB1 回收率范围为 79.68±1.25%～108.84±4.59%,OTA 回收率范围为 71.20±9.01%～113.19±1.20%,FB1回收率范围为 76.99±4.08%～105.96±5.36%,说明本方法测得的多重回收率有效。4.将本方法与ELISA方法测得的回收率相比结果基本一致,且都在允许范围内,进一步说明本文章建立的方法具有可行性。