[目的]代谢性疾病,如肥胖、糖尿病等在世界范围内高发,影响千百万人的健康,其发病机制不明,可能与慢性低度炎症等有关。可导致多种并发症,包括心脑血管疾病,慢性肾病,甚至增加肿瘤风险等,是严重的公共健康问题。越来越多的证据表明,肠道微生态在相关代谢性疾病的发生、发展中起重要作用。本课题聚焦通过调节肠道微生态,改善高脂诱导的小鼠肥胖及胰岛素抵抗的作用研究。葛根素是从葛根的根部提取的活性成分。葛根素有明显的抗肥胖作用,临床上多用于心脏相关的对症治疗,作用机制不明。本研究旨在探明葛根素的抗肥胖作用是否与肠道微生态改变相关。研究将以高脂诱导的肥胖（HFD）小鼠为模型,分别探讨葛根素对肠道菌群及肥胖、胰岛素抵抗、炎症和肠道屏障功能等的影响,阐述葛根素调节微生物群特征及改善HFD小鼠肥胖和胰岛素敏感性的可能机制和作用靶点。[方法]1、葛根素改善HFD小鼠肥胖和胰岛素敏感性研究:采用高脂饮食喂养建立肥胖小鼠模型（HFD小鼠）,将小鼠分为四组:正常对照组（NC组）、HFD组、葛根素治疗组（HFD+PUE组）、葛根素对照组（PUE组）。治疗6周后,测定各组小鼠体重、血糖、腹膜下糖耐量,采用ELISA法、real time RT-PCR检测胰岛素含量、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、糖异生基因表达观察糖耐量和肝功能情况,油红O染色、HE染色检测肝脏脂肪变性。2、高脂和葛根素对小鼠肠道菌群影响的研究:在HFD小鼠模型上,收集小鼠盲结肠内容物,提取肠菌DNA,对16S rRNA基因的V4高变区进行PCR扩增,构建测序基因库,在Illumina MiSeq平台上进行高通量测序,使用Uparse软件、RDP classifier、GreenGene数据库、PICURSt等分析数据,确定小鼠肠道菌群的多样性和分布特征（Shannon指数＆PcoA等）、分析代谢通路特征、确定特定种属与表型关系,用real time RT-PCR验证特定菌,如Akkermansiamuciniphila丰度等。3、葛根素保护肠道屏障功能研究:在HFD小鼠模型和葛根素处理的Caco-2细胞模型上,采用免疫印迹、real time RT-PCR等方法,研究葛根素对肠道屏障功能相关蛋白和肠道炎症因子表达的影响。[结果]1、在高脂饮食诱导的HFD小鼠模型中,葛根素降低HFD小鼠体重,改善糖耐量,降低胰岛素水平,改善肝功能,改善肝脏脂肪变性,降低肝脏糖异生基因表达,表明葛根素可以改善HFD小鼠的肥胖和胰岛素敏感性。2、在高脂饮食诱导的HFD小鼠模型中,高脂饮食和葛根素均会显著改变肠道微生物群的构成,葛根素处理增加了Akkermansia muciniphila丰度,提示葛根素改善HFD小鼠肥胖和胰岛素抵抗与肠道微生态改变密切相关。3、在高脂饮食喂养建立HFD小鼠模型和葛根素处理Caco-2细胞模型中,葛根素通过提高肠道Muc2和Reg3g的表达来保护肠道屏障功能,提高肠道紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达来降低肠道通透性,降低肠道炎症因子,调高肠道抗炎因子,改善肠道炎症。[结论]葛根素在显著改变高脂饮食诱导的肥胖及相关表型,包括脂肪肝、胰岛素抵抗、肠道炎症和屏障功能受损的同时,明显改变了肠道微生态组成,增加了Akkermansia muciniphila的丰度,为肠道微生态在饮食诱导的肥胖和代谢紊乱中的作用机制研究提供了新的证据。