庚酮类化合物EB30诱导肺癌细胞凋亡机制的研究

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研究目的:槲寄生植物提取物1,7-二(4-羟基苯基)-1E,4E-庚二烯-3-酮(EB30)抑制肺癌细胞增殖、促进肺癌细胞凋亡的机制研究。研究方法:本实验以肺癌细胞株A549和NCI-H292为研究对象,采用CCK-8法和RTCA法检测EB30对肺癌细胞增殖活性的影响;PI染色后利用流式细胞仪分析检测EB30对肺癌细胞周期的影响;DAPI染色法协同Annexin V/PI双染法分析EB30作用后肺癌细胞凋亡情况;采用了DCFH-DA染色法,流式细胞仪检测EB30处理细胞内ROS的含量变化;采用JC-1染料进行染色,流式细胞学观察分析EB30处理后肺癌细胞MMP的变化;Western blot实验检测EB30对于凋亡相关蛋白以及PI3K/Akt、ERK1/2信号通路蛋白的表达。结果:EB30在一定浓度范围内能够明显抑制肺癌细胞增殖,而对正常肺组织细胞不产生明显毒性,进一步研究表明EB30不仅能够诱导细胞周期阻滞、促进胞内活性氧(ROS)的大量产生,而且能够激活细胞内、外凋亡途径从而诱导肺癌细胞凋亡。此外,EB30能够上调p-ERKl/2和p-P90RSK蛋白表达,下调Akt和P70RSK蛋白表达,LY294002(PI3K抑制剂)联合U0126(MEK抑制剂)能够进一步增强EB30对肺癌细胞的增殖活性的抑制,Western blot实验结果进一步证实PI3K/Akt、ERK1/2通路蛋白表达变化与CCK-8实验结果一致。结论:EB30为潜在的先导抗癌药物,能够较为明显的抑制肺癌细胞增殖,诱导肺癌细胞凋亡,其机制可能通过激活ERK1/2并抑制PI3K/Akt通路进行调节的。
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