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乙肝是病毒性乙型肝炎的简称,它是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的,以肝脏损害为主的一组全身性传染病。全世界大约有20亿乙型肝炎病毒感染者,每年由于急慢性HBV感染而死亡的人数高达100万,至2004年全球HBV慢性感染者已达4亿,我国有1.2亿HBV携带者,占世界乙肝感染者的30%。乙型肝炎病毒(HBV)是一种DNA病毒,与土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitisvirus,WHV)、地松鼠肝炎病毒(ground squirrel hepatitis virus,GSHV)及鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus,DHBV)同属嗜肝DNA病毒科(hepadnavirus),嗜肝DNA病毒属(orthohepadnavirus)。HBV的致病机制十分复杂,除了HBV对肝细胞直接损害外,主要是通过宿主的免疫应答以及病毒与宿主间的相互作用引起肝细胞的病理改变所致。大致有细胞免疫、体液免疫、自身免疫等机制所引起的损害三种方式:一、细胞免疫是乙型肝炎病毒感染后引起肝细胞损害的主要机制,也是机体进行HBV清除的重要手段。受染肝细胞表面表达的HBcAg加上细胞表达的MHCI类分子通过免疫细胞的双识别而引起一系列免疫应答,主要是Tc细胞(CTL),巨噬细胞和NK细胞等通过不同的途径和方式,对表达病毒抗原的肝细胞(病毒感染细胞VIC)发起杀伤效应以清除病毒,同时造成肝细胞的损伤。二、HBsAg及抗HBs或HBeAg及抗HBe的抗原抗体复合物如沉积于周围组织的小血管壁,可引起Ⅲ型超敏反应,临床上出现各种相关的肝外症状,主要表现为短暂发热、膜性肾小球肾炎、皮疹、多发性关节炎及小动脉炎等,其中以肾小球肾炎最为重视。如果免疫复合物于肝内大量沉积,引起毛细血管栓塞,可诱导肿瘤坏死因子(TNF)产生而导致急性肝坏死,临床表现为重症肝炎。三、HBV感染肝细胞后,在肝细胞表面不仅有病毒的特异性抗原表达,还会引起肝细胞表面自身抗原的改变,暴露出膜上肝特异性脂蛋白抗原(LSP)和肝细胞膜抗原(LMAg)。LSP和LMAg可作为自身抗原诱导机体产生自身抗体,通过K细胞介导的ADCC效应引起自身免疫应答,或通过CTL的杀伤作用或释放细胞因子的直接或间接作用损害肝细胞。本实验以对乙肝的中西医治疗研究为基础,研究实验药物茵陈蒿汤加味方在动物龙岩麻鸭体内以及HepG2 2.2.15细胞上对HBV的抑制作用。茵陈蒿汤出自《伤寒论》,由茵陈蒿、栀子、大黄组成,其中茵陈为君药、清热利湿退黄疸;栀子为臣药通利三焦,导湿热下行,利湿热从小便出;大黄为佐药、泻热逐瘀。三药合用清热利湿,解毒退黄,主要用于治疗湿热黄疸症。现代研究表明,它具有利胆、保肝、解热抗炎镇痛、抗菌抗病毒的作用。体内实验研究发现,茵陈蒿汤加味方中、小剂量组给药后各时点血清DHBV-DNAOD490值与给药前比较,差异无统计学意义;与给药前比较,大剂量组在给药后第21天、第28天血清DHBV-DNA OD490值降低(P＜0.01,P＜0,05);与给药前及病毒对照组各组各相应时点比较,拉米夫定组在给药后第7天、第14天、第21天和第28天血清DHBV-DNA OD490值降低(P＜0.01,P＜0,05)。体外实验通过对HepG2 2.2.15细胞的生长规律的研究,了解到细胞生长周期大约为十天,两抗分泌均可以,分泌高峰分别为第四、五天。药物的细胞毒性实验发现茵陈蒿汤加味方在细胞上的半数毒性浓度为26.16mg/ml;拉米夫定的半数毒性浓度＞1mg/ml。茵陈蒿汤加味方半数抑制浓度13.1mg/ml对HBsAg有抑制作用,其治疗指数TI=2.00,半数抑制浓度在18.4mg/ml对HBeAg有抑制作用,其治疗指数TI=1.42;阳性对照药物拉米夫定在半数抑制浓度0.48mg/ml对HBsAg有抑制作用,其治疗指数TI＞2.08;在实验范围内对HBeAg无抑制作用。