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目的：大肠癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病率有逐年上升趋势。大肠癌患者虽可经过手术，化疗、放疗及其它综合治疗有一定的疗效，但资料显示，约有30%的患者仍在五年内死于复发和远处转移。因此，研究和探讨大肠癌的侵袭和转移机制成为目前研究的热点。众多研究发现，肿瘤的浸润和转移是一个多步骤的复杂过程，其中肿瘤周围基膜的降解是肿瘤细胞向邻近结缔组织浸润进而向远处转移过程中最基本的一步。基膜完整性的丧失与局部扩散，远处转移和不良预后密切相关。而由肿瘤组织分泌的基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases MMPs）能够引起细胞外基质和基膜的降解，从而促进肿瘤的侵袭和转移。同时，其抑制因子可以抑制基质金属蛋白酶的活性，从而保持基膜的完整性，阻止肿瘤的侵袭和转移。目前，国内对基质金属蛋白酶及其抑制剂在大肠癌中的生物学作用研究较少。因此，本课题利用RT-PCR方法，在基因水平上研究MMP-2、TIMP-2和MT1-MMP在大肠癌中的表达特点及与大肠癌的临床病理之间相互关系，以探讨三者在大肠癌的侵袭和转移机制中的作用，并可为基质金属蛋白酶抑制剂在大肠癌治疗中的应用提供理论依据。方法：随机选取2001年8月至2001年12月在河北<WP=4>医科大学第四医院行外科手术治疗的30例大肠癌患者的肿瘤组织标本，并以距肿瘤边缘10cm的正常粘膜作为对照，标本均于离体半小时内采集，液氮速冻，后转至-80冰箱贮存待用。所有标本均经病理证实。以异硫氰酸胍-酚-氯仿（acid guanidinium-phenol-chloroform , AGPC）一步法提取组织的总RNA，应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术扩增MMP-2、TIMP-2和MT1-MMP基因，同时扩增β-actin作为内参照。扩增产物电泳后经凝胶成像分析系统照相、分析，以电泳条带上各产物的面积与灰度值的乘积作为积分光密度值，并将MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP与β-actin的积分光密度值的比值作为大肠癌中各产物的表达水平的参数.运用 X2检验，t检验，方差分析，相关分析，多元逐步回归，对数据进行分析和统计。 结果：1. 30例大肠癌组织中的MMP-2mRNA表达均阳性，表达率为100%。在正常粘膜有22例（73.33%）表达阳性，两者之间表达率具有极显著性差异（P<0.01）。MMP-2 mRNA的表达水平在肿瘤组织及正常组织分别为0.3472±0.0429、0.1850±0.0333，两者之间具有极显著性差异(P<0.01)。在大肠癌组织中，MMP-2mRNA的表达水平在淋巴结转移组显著高于无转移组（P<0.05）；并且其表达水平在DukesB、C、D期逐步升高，在D期与A、B、C期之间存在显著性差异(P<0.05 )；多元逐步回归分析显示， MMP-2mRNA的表达水平与Dukes分期呈正相关（P<0.01）；大肠癌组织中MMP-2mRNA的表达水平与年龄、性别及肿瘤大小、分化程度、部位等因素无关（Ｐ＞<WP=5>0.05）。2. 30例大肠癌组织中有29例（96.79%）扩增出TIMP-2，30例正常粘膜中有28例(93.39%)扩增出TIMP-2,两者之间表达率无显著差异(P>0.05)。在肿瘤组织及正常组织中TIMP-2mRNA的表达水平分别为0.7269±0.0496、0.6325±0.0532，两者之间无显著差异(P>0.05)。在大肠癌组织中， TIMP-2mRNA的表达水平随Dukes分期进展而升高，而只有在D期的表达水平与A、B、C期存在显著性差异(P<0.05)； 多元逐步回归分析显示，TIMP-2mRNA的表达水平与Dukes分期呈正相关（p<0.01）。在大肠癌组织中，TIMP-2mRNA的表达水平与年龄、性别、肿瘤部位、大小、分化程度及淋巴结转移无关(P>0.05)。3. 在30例肿瘤及正常组织中均有MT1-MMPmRNA的表达。在肿瘤组织及正常组织中MT1-MMPmRNA的表达水平分别为0.7830±0.0548、0.5403±0.0531，两者之间有极显著性差异(P<0.01)。在大肠癌组织中，MT1-MMP mRNA的表达水平在淋巴结转移组显著高于无转移组（P<0.05）；并且其表达水平在Dukes B、C、D期逐步升高，在D期与A、B、C期之间存在显著性差异(P<0.05 )；多元逐步回归分析显示，MT1-MMPmRNA的表达水平与Dukes分期呈正相关（P<0.05）；大肠癌组织中MT1-MMPmRNA的表达水平与年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、大小均无关。4. MMP-2/TIMP-2在大肠癌组织中及正常粘膜中分别为0.5064±0.0618、0.2786±0.0509，两者之间具有极显著性差异(P<0.01)。多元逐步回归分析显示，MMP-2与<WP=6>TIMP-2的比值（MMP-2/TIMP-2）在肿瘤组织中与年龄、性别、肿瘤的部位、大小、分化程度及Dukes分期、淋巴结转移均无关(P>0.05)。5. 在正常粘膜中，MMP-2mRNA与TIMP-2mRNA的表达有显著相关性（ P<0.05），MT1-MMPmRNA与MMP-2mRNA, TIMP-2mRNA的表达均无显著相关性 (P>0.05)。在大肠癌组织中，MMP-2mRNA与TIMP-2 mRNA的表达有显著相关性（P<0.05）， MT1-MMPmRNA与MMP-2mRNA，TIMP-2mRNA的表达均有极显著相关性（P<0.01）。 结论：1.大肠癌组织中，MMP-2mRNA的表达率及表达水平均显著高于正常组织，MMP-2mRNA的表达水平与淋巴结转移及Dukes分期密切相关。提示MMP-2在大肠癌的发生发展，特别是在肿瘤的浸润、转移过程中发挥了重要作用，有可能成为预测大肠癌转移潜能的临床指标。2.在大肠癌组织中， TIMP-2mRNA的表达水平与Dukes分期密切相关，说明TIMP-