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类细菌素是通过某些细菌生理代谢产生的,并且分泌到体外环境中的具有抑菌作用的蛋白质或者多肽,其不仅能够抑制革兰氏阳性菌还能够抑制革兰氏阴性菌或是真菌,具有较宽的范围的pH稳定性,这些特性决定了类细菌素比细菌素具有更广阔的应用前景。目前测定微生物发酵产生的抑菌物质活性的方法是琼脂扩散法,但是这种方法周期长、稳定性差。本文以香味菌(Myroides spp.)JRW为指示菌,建立比浊法测定类细菌素抑菌活性的快速测定方法,优化后的方法为:香味菌JRW的接种种龄为对数生长中期,接种量为2%,30℃下振荡(150 r/min)培养5 h,测定生物量(OD600),计算抑菌率。结果表明:当抑菌率在14.69%~84.80%范围内时,其与发酵上清液添加量之间呈线性相关(R2=0.9911),平均回收率为100.10%,相对标准偏差(RSD)<1.47%。与牛津杯法相比较,所建立的比浊法灵敏度高、精密度高、测定周期短。以乳酸乳球菌NZ9000 (pNZ8148)为指示菌,将该比浊法应用于nisin效价的测定,验证同样可行,因此该法可适用于测定发酵液中类细菌素活性和细菌素纯品。微生物培养基中有机氮源成分复杂,因不同批次、不同产地等原因造成质量不稳定,对微生物发酵水平产生较大影响。为研究乳酸乳球菌NFL菌株产类细菌素的确切营养需求,本文对其全合成培养基进行优化。首先应用单因素试验方法,分别筛选出碳源、无机氮源、氨基酸、维生素、碱基的最佳种类和浓度,随后运用正交试验设计进一步进行7因素3水平优化,得出NFL菌株产类细菌素最佳全合成培养基组成(g/L):果糖7,硫酸铵9,半胱氨酸0.09,维生素B70.025,胸腺嘧啶0.004, MgSO40.025, MnSO40.03,在该条件下发酵上清液的抑菌率为54.23%,比优化前(MRS培养基)提高11.28%。