5-羟甲基胞嘧啶/5-甲基胞嘧啶抗体的制备及H4R3me2s精氨酸去甲基化酶筛选

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hulei_1188
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表观遗传变异是指,在基因的DNA序列没有发生改变的情况下,基因功能发生了可遗传的变化,并最终导致了表型的变化。其主要研究对象包括:DNA修饰(DNA甲基化)、组蛋白修饰(组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化等)、染色体重塑和非编码RNA等。  已知DNA的甲基化是最常见的DNA修饰。它在细胞的分化、胚胎发育、X-染色体的失活和癌症的发生发展过程中起着重要作用。一般认为,DNA上胞嘧啶的甲基化是比较稳定的,虽然胞嘧啶的甲基化和组蛋白的甲基化修饰一样具有可逆性。但这些年来对DNA的去甲基化酶的研究并没有定论。已有文章报道TET1蛋白可以将5-甲基胞嘧啶催化成为5-羟甲基胞嘧啶。这一发现给人们提供了新的科学思路:5-羟甲基胞嘧啶作为第6种DNA碱基,可能参与了DNA的去甲基化过程,并且具有重要的生理生化功能。因此,本文作者的研究主要集中在5-羟甲基胞嘧啶的生理生化功能上。现已制备完成5-羟甲基胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的特异性抗体,并且可用于多种实验。为研究5-羟甲基胞嘧啶的相关课题提供了有用的技术支持。  同时,本论文的作者还建立了一种高通量高内涵的研究手段,可利用组蛋白的相应抗体对组蛋白的去甲基化酶候选基因进行相对快速地筛选。目前已利用此方法对组蛋白H4第三位上的精氨酸的对称二甲基化(H4R3me2s)位点的去甲基化酶进行了筛选。  
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