银杏内酯B(GB)是天然产物中最有效的血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂，作者所在工程研究中心前期开发的GB注射液对缺血性脑血管病(ICVD)具有良好疗效。鉴于GB的脑靶向性尚存提升空间，工程中心根据ICVD的“损伤级联反应”机理，以GB为母核，引入具钙离子拮抗活性的分子T，设计合成了双靶点GB-T孪药(TGB)，期待TGB在发挥PAF受体和钙离子拮抗活性的同时能提高GB的脑靶向性。为验证和改进TGB设计，本文围绕TGB的脑靶向性及药效机制进行了研究，主要结果如下:　　 1.TGB经酯酶分解方有拮抗PAF受体和Ca2+的作用。　　 (1)TGB在血浆中酯酶的作用下可快速解离出GB和T，降解反应符合表观一级反应，降解方程为InC=-0.0952t+2.8297(r2=0.9874)，降解半衰期t1/2为3.16min。　　 (2)TGB、GB和联合用药(GB+T)溶液在体外能浓度依赖地抑制PAF诱导的兔血小板聚集，其IC50值分别为8.83、8.58、8.36μmol·L-1，无显著性差异。　　 (3)TGB、GB和GB+T溶液在体内可剂量依赖地抑制PAF诱导的兔血小板聚集，低剂量组的抑制率分别为42.24、43.32和41.43％，高剂量组的抑制率分别为58.03、58.31和58.85％，活性基本相当。　　 (4)经生物大分子相互作用仪分析，TGB、GB与L型钙离子通道蛋白均无结合;T、GB+T溶液与通道蛋白的KD值分别为16.46和14.19μmol·L-1，表明TGB拮抗Ca2+依赖于解离的T。　　 2.TGB具脑靶向性，且主要得益于其较高脂溶性和对P-gp的强抑制作用。　　 (1)大鼠分别注射TGB和GB后，以脑部GB计，治疗有效性TAGB为6.87，显示TGB具显著脑靶向性。　　 (2)经测定，TGB脂水分配系数高于GB（logPTGB=1.03＞logPGB=0.61），脂溶性增强有助于通过血脑屏障。　　 (3)据分子对接计算，TGB、GB和T三者中，TGB与P-gp的亲和力最大，能有效抑制P-gp对GB和T的外排作用，从而升高脑内GB和T的总含量。　　 3.TGB给药优于GB单独给药和GB+T联合给药，且具长效和缓释作用。　　 (1)TGB和GB+T的脑靶向性比较结果显示，GB+T不具脑靶向性，TGB给药(TAGB=6.87)优于联合用药(TAGB=0.94)。　　 (2)GB(rGB)在脑组织中的Cmax值相比原药GB(GB0)增加了1.89倍，t1/2分别是GB(GB+T)和GB0的5.14和3.33倍，CL相比于GB(GB+T)和GB0分别降低了5.70和5.36倍，表明TGB给药可增加GB在脑部的峰值浓度，且呈现长效缓释的特征。　　 (3)TGB给药相比于GB给药，其分解释放之GB的AUC分布比例在脑中由1.86％升高至6.80％，在肝中由24.24％下降到16.31％，DTIGB(brain/liver)为2.32;相比于GB+T给药，DTIG(Brain/liver)为3.84。提示:TGB既可提高脑靶向性又可降低肝脏的代谢负荷。