目的：设计出一种新型的人工转录因子（artificialtranscription factor，ATF），使其能够特异性结合于乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV） X基因启动子区域的靶序列，通过下调X基因来干扰和抑制HBV DNA的正常的复制和表达，为乙型肝炎的基因治疗提供实验依据。方法：（1）通过生物信息学工具获取人工锌指蛋白（zinc fingerprotein，ZFP）氨基酸序列，经过密码子优化后构建重组质粒pEGFP-N1-ZFP，将其转染COS-7真核表达细胞，通过观察绿色荧光蛋白的表达、RT-PCR和Western blot检测其在真核细胞中的表达；（2）构建含有ZFP结合结构域和KRAB效应结构域的ATF，将其转染COS-7真核表达细胞，通过RT-PCR和Western blot检测其在真核细胞中的表达；（3）将pcDNA3.1(+)-ATF转染HepG2.2.15细胞，通过酶联免疫法ELISA、细胞免疫组化、荧光定量方法、RT-PCR等方法检测其对HBVDNA复制和表达的抑制作用。结果：（1）成功构建了pEGFP-N1-ZFP重组质粒，并验证其在COS-7细胞中的表达；（2）成功构建ATF，并验证其具有相应的生物学活性；（3）成功验证了重组质粒pcDNA3.1(+)-ATF能够抑制HepG2.2.15细胞内HBV DNA的复制和表达。结论：针对HBV X基因靶序列设计出来的ATF能够抑制HepG2.2.15细胞内HBV DNA的复制和表达。