【摘 要】
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肾癌是泌尿系统常见肿瘤之一,是仅次于膀胱癌在泌尿系统居第二位的恶性肿瘤,随着人均寿命的延长和检查技术的提高,临床发现的病例呈增多之势。肾癌首选手术治疗,由于传统的放
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肾癌是泌尿系统常见肿瘤之一,是仅次于膀胱癌在泌尿系统居第二位的恶性肿瘤,随着人均寿命的延长和检查技术的提高,临床发现的病例呈增多之势。肾癌首选手术治疗,由于传统的放疗、化疗对肾癌疗效均不理想,对于术后或失去手术指征的患者进行生物治疗的探索成为新的热点之一。 自杀基因疗法,又称药物敏感基因疗法,是生物治疗的主要方法之一,也是目前国内外研究较多的方法之一。葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidafe, β G)是溶酶体中的酸性水解酶,参与机体的生理、病理及药物代谢等过程。它能够特异性水解葡萄糖醛酸苷糖甙键,释放出葡萄糖醛酸和配基。β G在ADEPT(抗体导向酶/前体药疗法)的应用研究中,已证实其前体药对肿瘤的选择性杀伤作用。将ADEPT与基因治疗相结合,就有可能产生一种新的自杀基因治疗系统,为肾癌的治疗寻找一条新的有效途径。本研究通过利用脂质体(LipofectAMINE)介导法将含有全长β G cDNA的真核表达载体pcDNA3.1(+)-β G转染至人肾癌细胞GRC-1中,经G418筛选,获得了稳定转染β G基因的细胞克隆;通过基因组PCR检验和免疫荧光、免疫组化、分别从DNA及蛋白水平证实β G基因已经稳定转入GRC-1细胞中并获得β G高表达。并通过光镜、电镜、
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