目的:探讨三氧化二砷（As₂O₃）对体外AML（非M3）患者骨髓细胞凋亡的作用及其机制,从而为临床应用新药物新方法治疗AML提供实验依据。方法:1.形态学方法:在高倍显微镜下观察经瑞氏-姬姆萨染色的不同浓度梯度（0,0.5,1.0,2.0μmol/l）作用于AML（非M₃）患者（以下简称AML患者）骨髓细胞不同时间（24h,48h,72h）后,细胞形态学的变化。2.采用流式细胞仪检测不同浓度梯度As₂O₃体外对AML患者骨髓细胞作用72h后的细胞凋亡率。3.采用巢氏甲基特异性PCR法（nested-methylation specific PCR,n-MSP）检测p16基因甲基化状态,RT-PCR法检测p16基因mRNA的表达水平。结果:1.形态学的观察:As₂O₃诱导AML患者骨髓细胞于24小时出现核膜皱缩,部分胞浆内可见空泡变性,48小时达到凋亡高峰出现凋亡小体。2.流式结果经统计处理结果:AnnexinⅤ/PI标记法观察发现,As₂O₃有促进AML患者骨髓细胞凋亡的作用。体外As₂O₃作用于AML组、正常人组72h后,随着As₂O₃浓度的增加,AML患者和正常人组骨髓细胞的凋亡率都逐渐增高,各不同剂量组之间有显著性差异（P<0.05）;在相同药物浓度下,As₂O₃对AML患者组的凋亡效应与正常人组之间也存在显著性差异（P<0.05）。3. n-MSP法:As₂O₃诱导AML患者骨髓细胞随浓度的增加p16基因甲基化状态明显减弱甚至消失;RT-PCR法:As₂O₃诱导AML患者骨髓细胞随浓度的增加p16基因表达增强,不同浓度组间相比,其差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1. As₂O₃能够使AML（非M₃）患者骨髓细胞中失活p16基因去甲基化而重新表达。2. As₂O₃能够诱导AML（非M₃）患者骨髓细胞凋亡,并呈剂量依赖性。