纽荷尔脐橙中赤霉素受体基因CsGID1的功能分析

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近年来,赤霉素受体基因GID成为研究的热点,在许多植物中如拟南芥、水稻、杨树、棉花,葡萄等有所研究,但在柑橘上的研究未见报道。为了研究赤霉素受体基因GID在柑橘上的作用,本论文以纽荷尔脐橙中赤霉素受体基因CsGID1为研究对象,采用转基因技术获得转CsGID1基因烟草植株,并利用石蜡切片技术、亚细胞定位技术、CIRAS-2光合仪,实时荧光定量PCR技术从植物细胞组织、光合生理特性、目的基因的表达量等方面对转基因植株和对照植株进行了分析。主要研究结果如下:1.CsGID1基因序列经Blastn分析,发现它与葡萄(AFG17072.1)和拟南芥(XP002874383.1)的GID1核酸序列相似性分别为81%和79%。用Blastx分析,纽荷尔脐橙中赤霉素受体基因GID1与陆地棉的GID1同源性最高。2.本实验以转基因烟草叶片主脉为材料,通过石蜡切片实验,观察比较转基因植株和对照植株,结果显示,转基因CsGID1烟草叶片主脉木质部导管较对照植株多,且排列紧密不整齐。通过将pBI121-CsGID1-GFP转入洋葱表皮细胞中发现,CsGID1与GFP的融合蛋白在细胞核中表达。3.分别用GA3和多效唑处理转基因阳性植株,结果表明GA3处理的转基因植株最高,净光合速率最大,然而叶绿素含量(1.55±0.09mg/g)最少;多效唑处理的转基因植株株高最矮,叶绿素含量(1.71±0.15mg/g)及净光合速率较大。4.利用实时荧光定量PCR对CsGID1基因在烟草的表达进行了分析,结果显示,CsGID1在转基因阳性植株中的表达量最高,其次是GA3处理的转基因植株,然而在多效唑处理的转基因植株中的表达量最低。
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