文心兰生防菌的筛选、鉴定及其应用 ——以木霉菌防治炭疽病为例

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文心兰(Oncidium hybridum)是世界重要的盆花和切花之一,优美的花形花色备受人们的喜爱。文心兰栽种主要以大棚为主,而大棚高温高湿的环境容易导致各种病害的频发。目前主要以选育抗病品种和施用化学药剂的方式防控病害,但是容易使病菌产生抗药性和造成环境污染等问题,因此生物防治是现阶段研究的热点。生防菌主要来源于植物内生菌,植物中含有丰富的天然微生物资源库,具有促进植物生长、增强宿主植物抗逆性和防治病害等多种生物功能,是进行生物防治很有潜力的资源。为筛选生防菌,本研究从文心兰感病植株中分离获得了大量病原真菌,从健康植株中分离得到大量内生菌。通过平板对峙、发酵液抑菌、致病性验证和广谱抑菌性实验,筛选出潜在生防菌。通过拮抗效果比较,木霉菌的拮抗效果最优。通过固体发酵实验产生大量木霉孢子,验证了木霉菌对文心兰炭疽病的防治效果。建立菌苗共生体系,进一步探究木霉菌对文心兰组培苗的促生效果。主要研究结果如下:(1)内生菌分离从健康文心兰植株中获得内生真菌有木霉属(Trichoderma)、青霉属(Penicillium)、炭团菌属(Hypoxylon)、镰孢属(Fusarium)、篮状菌属(Talaromyces)、炭角菌属(Xylaria)、炭疽菌属(Colletotrichum)和曲霉属(Aspergillus),优势种为篮状菌属和青霉属;内生细菌有芽孢杆菌属。从感病植株中获得叶点霉属(Phyllosticta)、镰刀菌属(Fusarium)、刺盘孢属(Colletotrichum)球囊菌属(Plectosphaerella)、青霉属(Penicillium)、栓菌属(Trametes)、踝节菌属(Talaromyces)、Annulohypoxylon属、Neoscytalidium属、Muyocopron属,优势菌群为镰刀菌属。(2)潜在生防菌的筛选通过初筛、复筛和致病性验证得到12株潜在生防菌,通过与12株病原真菌包括腐皮镰孢菌(Fusarium solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、热带生炭疽菌(Colletotrichum tropicicola)、鹰嘴豆枯萎镰刀菌(Fusarium delphinoides)、隔孢假壳科真菌(Paraconiothyrium thysanolaenae)、画眉草弯孢菌(Curvularia eragrostidis)、芒果球座菌(Guignardia mangiferae)、巨座壳科真菌(Muyocopron alcornii)进行广谱性抑菌实验。最终得到潜在生防菌包括青霉菌属(Penicillium)、篮状菌属(Talaromyces)、木霉菌属(Trichoderma)、镰刀菌属(Fusarium)和芽孢杆菌(Bacillus)。(3)木霉菌对炭疽病的防治效果及对组培苗的影响运用固体发酵的方式让木霉菌产生大量孢子进行盆栽防效实验,各个处理当中T3处理(接种3天木霉菌后接种胶孢炭疽菌)防效最显著,达88.89%;木霉菌可以诱导过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、脯氨酸(Pro)酶活,降低苯丙氨酸解氨酶(PAL)和丙二醛(MDA)酶活。木霉菌可以显著提高苗的鲜重率和可溶性糖含量,分别为108.11%和16.14 ng/L。
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