中间锦鸡儿CiCHIL的克隆与功能分析

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:junee1122
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作为植物一大类次生代谢产物,黄酮类化合物在植物的生长发育中起重要作用,参与植物花、果实、种子的着色并参与植物与环境之间的互作。同时,黄酮类化合物对人体的身体健康有促进作用。黄酮代谢通路上有许多酶将底物催化成诸多衍生物,例如查尔酮异构酶(chalcone isomerase CHI)。CHI的位置处于苯丙烷代谢通路的一个分支点,催化查尔酮到黄烷酮的反应。该反应产生的底物在之后的代谢通路上生成许多衍生物,这些衍生物在植物的生长发育和与外界互作的过程中起重要的作用。本文从中间锦鸡儿中克隆到了一个CHI基因并对其功能进行了研究,具体结果如下:1.中间锦鸡儿CiCHIL基因gDNA全长1434bp、cDNA全长为941bp、ORF为630bp,5’-UTR长164bp,3’-UTR长147bp,共编码209个氨基酸,其中包含一段12个腺苷酸组成的Poly A尾,共含4个外显子和3个内含子。2.构建过表达载体p35S::CiCHIL,并转化野生型拟南芥,得到纯合体株系。3.检测过表达植株当中总黄酮含量,过表达CiCHI基因的拟南芥中总黄酮含量高于野生型拟南芥。4.利用实时荧光定量PCR检测了 UV-B处理下CiCHIL的表达情况,发现CiCHIL受紫外诱导。对野生型和过表达植株进行紫外处理,发现紫外处理后过表达株系表现出较野生型更强的质膜稳定性。
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