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第一部分：高糖环境对人脐静脉血管内皮细胞凋亡及Caspase-3表达的影响 目的：探讨高糖环境对人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)凋亡的影响，及其与Caspase-3表达的相关性。 方法：将培养成功的HUVEC以不同浓度的葡萄糖(5.5mmol/l和33mmol/l）培养48h，TUNEL法观察细胞凋亡情况；流式细胞仪（Annexin V-FITC及PI双荧光）检测细胞存活、凋亡、坏死情况；Western Blot法观察细胞中活性Caspase-3的表达。 结果：光镜观察，高糖组内凋亡细胞明显多于正常糖浓度组；随机观察三个视野，高糖组（33mmol/l）TUNEL阳性的细胞核多于正常糖浓度组；流式细胞仪结果显示，正常糖浓度组（5.5mmol/l）细胞凋亡率为4.10±2.16％，细胞坏死率为0.47±0.05%，细胞存活率为94.44±2.13%，高糖组（33mmol/l）细胞凋亡率为16.13±1.51%，细胞坏死率为1.09±0.27%，细胞存活率81.99±1.13%，凋亡细胞百分率与正常组相比差异有统计学意义(P<0.05)；Western Blot法显示正常组Cas3/β-actin为0.062±0.005，高糖组Cas3/β-actin为0.125±0.05，差异有统计学意义(P<0.05)。高糖组活性Caspase-3表达量增强。HUVEC凋亡与Caspase-3表达呈正相关。 结论：高糖环境培养下的人脐静脉血管内皮细胞凋亡增加，可能与活性Caspase-3表达增强有关。 第二部分缺氧对整合素α5β1在视网膜表达的影响及ATN-161抑制视网膜新生血管作用的初步研究 目的：整合素α5β1在内皮细胞参与的许多类型新生血管中表达上调，包括肿瘤新生血管和视网膜新生血管。生长因子和肿瘤诱导的血管新生、肿瘤生长，可以被整合素α5β1的拮抗剂所抑制。而本研究旨在观察整合素α5β1在缺氧诱导的视网膜病变中的表达，及其拮抗剂ATN-161对抗视网膜新生血管的作用。 方法：建立氧诱导视网膜病变（Retinopathy of premature,ROP）小鼠模型，观察整合素α5β1在ROP小鼠模型和rho/VEGF转基因小鼠中的表达。应用ROP小鼠模型，进行玻璃体腔内注射ATN-161，观察其抑制视网膜新生血管生成的作用。 结果：在ROP小鼠中，与正常氧浓度组小鼠相比，整合素α5β1表达明显增高。在玻璃体腔内注射给药的情况下，ATN-161能有效减少ROP小鼠的视网膜新生血管生成，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论：整合素α5β1与缺氧诱导的视网膜新生血管密切相关，ATN-161在ROP小鼠模型中有抑制新生血管生成的作用，作为整合素α5β1的拮抗剂，可能在未来临床中成为抗VEGF治疗的辅助药物。