食道癌是世界上最常见的导致死亡的恶性肿瘤之一。食道癌的发病率在不同国家以及同一国家的不同地区差距非常大,甚至达到几百倍,世界上食道癌死亡率最高的国家是中国。食道癌主要包括鳞状细胞癌和腺癌,食道鳞状细胞癌是预后最差的消化系统肿瘤之一。早期食道癌病人临床症状多种多样,而且临床和病理研究尚未揭示肿瘤背后复杂的生物学机理,因此难以做到食道癌的早发现、早诊断、早治疗。所以从分子生物学角度研究肿瘤的发病机理就成为当务之急。 本论文的目的就是为从分子水平揭示食道癌的发病机理提供重要的参考资料。近年来的研究发现,当胚胎发育时期特异表达的一些基因在成体中异常表达时,会导致肿瘤的发生。Hedgehog信号通路在脊椎动物和无脊椎动物发育过程中发挥多种重要作用。现已发现脊椎动物Hedgehog信号通路成员之一Sonic hedgehog (Shh)在胰腺癌中过度表达,并被认为与肿瘤发生有关。关于Shh在食道癌原癌中的表达,尚未见报道。本研究利用RT—PCR、原位杂交和免疫组织化学三种实验方法,检测了Shh及其受体Patched(Ptch)在食道鳞状细胞癌原癌组织中的表达情况,并分析和探讨了Shh和Ptch在食道鳞状细胞癌原癌组织中的表达与食道癌发病的关系。 本研究所用实验材料为随机收集的手术切除的7例男性病人和7例女性病人的食道鳞状细胞癌组织,这些病人都未进行过放疗和化疗。病人年龄从38岁到73岁不等,平均57.6岁。所收集的食道鳞状细胞癌组织包括4例高分化鳞癌、4例中分化鳞癌和6例低分化鳞癌。 首先用RT—PCR检测了14例食道鳞癌组织,其中8例有Shh表达。然后,用原位杂交和免疫组织化学方法分别从mRNA和蛋门质水平进行深入地研究,结果发现在14例食道鳞癌样品中Shh阳性表达的组织也为8例(即RT—PCR检测出的8例),其中包括2例高分化鳞癌、2例中分化鳞癌和4例低分化鳞癌。利用原位杂交和免疫组织化学方法,检测了上述14例食道鳞癌组织中Ptch