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油茶(Camellia oleifera)是我国南方重要的木本油料树种,茶油中富含油酸、亚油酸等不饱和脂肪酸,为优质食用油。但油茶种子含油率低,直接影响油茶的发展和经济效益的发挥。三酰甘油(TAG)是油茶最主要的储存脂类,而二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是TAG合成的Kennedy途径中唯一的限速酶,其主要作用是催化二酰甘油加上酰基脂肪酸形成三酰甘油,可见DGAT酶对TAG的累积起着直接作用。因此开展油茶DGAT基因的克隆和功能分析,对揭示油茶油脂合成的分子机制有重要意义。本论文主要研究结果如下：(1)油茶DGAT1基因的分离鉴定。在GeneBank中以DGAT为关键词进行搜索,选出5条产油植物DGAT1的氨基酸序列和全长cDNA序列,通过比对分析,在保守区设计了一对简并引物。以国家审定油茶优良品种--‘华硕’的近成熟种子胚乳为材料提取总RNA,逆转录制备cDNA,通过RT-PCR扩增出了一条大小约500bp的条带,测序得到506bp的部分cDNA序列。并在网上进行BLAST比对分析,确认所得片段为油茶DGAT1部分基因片段。(2)油茶DGAT1基因的全长cDNA克隆及生物信息学分析。根据油茶DGAT1基因的部分cDNA序列信息,设计了3条油茶DGAT1基因5’RACE特异引物和两条3’RACE用的特异引物。以‘华硕’的近成熟胚乳为材料提取总RNA,逆转录制备RACE ready cDNA,进行5’RACE和3’RACE扩增。拼接的序列在NCBI中BLAST确认为油茶DGAT1基因的全长cDNA序列,该基因命名为co-dgat1。通过Vector NTI9.0等生物软件的分析,此cDNA序列长1893bp,包含1个1548bp完整的CDS及121bp5’UTR和229bp3’UTR,编码515个氨基酸。应用一系列生物信息学进行预测分析,结果显示：其蛋白分子量为58.44k Da,理论等电点为8.70,其中正电荷氨基酸残基数目为46,负电荷氨基酸残基数目为38；CODGAT1蛋白质不稳定系数为46.41,属于不稳定蛋白质；其疏水指数从-3.31到3.744,有10个跨膜结构域。(3)油茶DGAT1基因的原核融合表达。将油茶DGAT1基因的开放读码框定向克隆到pET-30a载体上,构建的原核表达载体命名为pET-30a-DGAT1,该基因的编码蛋白在大肠杆菌中得以成功表达。