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CD8+T细胞在机体应对肿瘤细胞、病毒感染以及胞内病原体感染所进行的免疫调节和有效的免疫应答过程中发挥着重要功能。初始CD8+T细胞经过活化后可以分化为CD8+效应性T细胞或CD8+调节性T细胞。与CD4+T细胞相似，根据细胞分化条件不同、起调控作用的转录因子不同以及特异性产生细胞因子的差异，CD8+T细胞可以分为Tc1、Tc2、Tc9、Tc17等不同的效应性T细胞亚群以及CD8+调节性T细胞亚群(CD8+ Treg)。研究表明，具有免疫调节功能的CD8+T细胞类型很多，例如CD8+CD28-、CD8+CD122+以及Qa-1限制性CD8+T细胞等，这些细胞统称为CD8+ Treg。CD8+ Treg细胞在肿瘤免疫、移植免疫以及自身免疫中发挥着重要的免疫调节作用，对机体免疫系统稳态的维持意义重大。 本课题利用Tiger(IL-10/GFP)和10BiT(IL-10/Thy1.1)两种IL-10转基因报告小鼠，通过特定的细胞培养体系诱导出了一群IL-10分泌性CD8+T细胞。我们主要围绕细胞分化及调控机制、生物学特性以及生物学功能等几方面对该群细胞进行了研究。 1.通过对细胞分化条件的研究，证实细胞因子IL-4是促进CD8+T细胞分化为IL-10分泌性细胞的关键因子，且该细胞中IL-10的表达并不依赖于内源性的IFN-γ; 2.利用流式细胞染色以及实时荧光定量PCR的方法对该IL-10分泌性CD8+T细胞的生物学性质进行了分析。流式染色结果表明，与相同培养条件下产生的IL-10-CD8+T细胞相比，该群细胞高水平表达CD25、CD44以及CD69，因而表现出相对活化的表型特征;此外，细胞表面还高表达IL-7R以及IL-15R，说明其具有较强的存活能力。实时荧光定量PCR结果则表明这群IL-10分泌性CD8+T细胞表达一系列Tc2类细胞因子(IL-4，IL-5)，颗粒酶，穿孔素以及细胞周期调控因子Cdkn2a; 3.通过对CD8+T细胞中IL-10表达调控机制的研究，首次发现Cdkn2a能够调控IL-10的表达。首先，利用siRNA下调cdkn2a会导致IL-4诱导的IL-10表达水平明显降低。其次，与WT CD8+T细胞相比，来源于Cdkn2a-/-小鼠的CD8+T细胞表达IL-10的水平明显下降。研究证实，Cdkn2a对于IL-10表达的影响只局限于CD8+T细胞，其不影响CD4+T细胞以及抗原呈递细胞中IL-10的表达; 4.通过对这群IL-10分泌性CD8+T细胞进行体内外生物学功能的研究，发现其在体外能以依赖于IL-10和细胞接触的方式显著性抑制CD4+T细胞的增殖;此外，当给TNBS诱导的结肠炎小鼠眼静脉输入该群细胞时能够导致小鼠炎症减轻，其在该模型中可能通过抑制炎症部位的Th1反应来发挥保护作用，表明该群IL-10分泌性CD8+T细胞在机体内发挥着重要的免疫调节功能。 综上所述，本研究中我们定义了一群在IL-4诱导下依赖于Cdkn2a产生的IL-10分泌性CD8+T细胞，并对其生物学性质及功能进行了深入探讨。该项研究有助于我们进一步了解并完善CD8+T细胞在机体免疫应答中的重要作用。