【摘 要】
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维生素A结合蛋白在体内的含量很低,容易降解,从人或动物的血浆以及肾病综合征患者的尿中分离提取有活性的维生素A结合蛋白十分困难,极大的限制了对其结构、功能及代谢机制的
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维生素A结合蛋白在体内的含量很低,容易降解,从人或动物的血浆以及肾病综合征患者的尿中分离提取有活性的维生素A结合蛋白十分困难,极大的限制了对其结构、功能及代谢机制的研究,而且该蛋白价格昂贵,也不利于临床的广泛应用.随着生物学技术的发展,利用基因工程手段获取高产量、低成本,并且有实用价值的目的蛋白已成为可能.该实验在合成该蛋白基因上下游引物的基础上,利用PCR技术,从人睾丸cDNA库中钓取目的基因,并克隆于pGEM-T载体中,经序列测定证明与文献报道基本一致,再将目的基因从重组克隆质粒中亚克隆于pBV220原核表达载体中,转化宿主菌,经温度诱导后,进行SDS-PAGE电泳分析,发现在约21KD位置上出现了一条明显的蛋白带,与预期相符.说明目的基因在E.coliDH5α中获得了有效表达,为以后的研究工作奠定了基础.
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