P27基因是禽白血病病毒不同亚群之间的一段高度保守的基因。p27蛋白是病毒核心外壳的主要成分，有许多易于检测的病毒抗原，是制备群特异性抗体的首选抗原。本研究根据已发表的AMV BAI-A株的基因序列设计了一对特异性引物，以重组质粒pGEM-gag为模板，采用PCR法对p27基因进行亚克隆，构建重组质粒pGEM-p27。对重组质粒PGEM-p27和表达载体pET-28α进行双酶切，回收酶切产物，连接构建重组表达质粒。将构建成功的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，筛选含重组质粒的基因工程菌。重组工程菌经IPTG诱导得到高效表达，其细胞裂解物用SDS—PAGE及Western blotting进行检测。用Ni-NTA亲和层析法纯化表达蛋白，经SDS—PAGE方法及Western biotingt检测，分析纯化的蛋白。用p27蛋白按照常规的方法免疫健康家兔，5周后收集兔血清，用琼脂扩散法和ELISA法测定抗血清的效价，用Western blotting检测其特异性。 结果表明，本研究成功地亚克隆了禽白血病p27基因。所构建的表达质粒pET28α-p27在BL21(DE3)中成功表达了分子量约为30KDa的融合蛋白，与预测的大小一致。薄层扫描的结果显示p27蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25.3％。Western blotting检测显示表达的重组蛋白是特异性的。经Ni-NTA树脂纯化得到的产物纯度达97％。用琼扩试验检测抗血清的效价能达到1∶32。用抗血清作为一抗进行Western blotting检测，结果表明此抗血清是针对p27的多抗。用抗血清作为包被抗体，用AMV血毒作为检测抗原，进行ELISA试验，结果表明当抗血清稀释到4000倍时，其OD值仍可达到1.0以上。 本研究的完成为重组p27蛋白结构的探讨，p27单抗的制备及禽白血病抗原检测试剂盒的研制打下了坚实的基础。