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目的：观察糖皮质激素（GC）对大鼠成骨细胞自噬的影响，探讨自噬在糖皮质激素性骨质疏松（GIOP）发病机制中的作用。方法：选用雌性sprague-dawley(SD)大鼠120只，随机分为4组，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。对照组注射生理盐水，低剂量组、中剂量组和高剂量组分别注射1mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg地塞米松磷酸钠注射液，每周2次肌内注射，每周称重1次，每组均分别干预4周、9周、12周。干预前及干预结束后以双能X线吸收法（DXA）测定大鼠全身骨密度(BMD)。处死各组大鼠，透射电镜观察成骨细胞的自噬，采用原位杂交法和免疫组化法检测大鼠成骨细胞骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)、自噬微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Beclin1及Atg5的mRNA和蛋白表达水平。结果：1.对照组大鼠体重随时间逐渐增加；干预4周、9周、12周，低、中、高剂量组大鼠体重低于对照组（p＜0.01），高剂量组大鼠体重低于较低剂量和中剂量组（p＜0.05）。2.干预4周，低、中、高剂量组大鼠BMD均与对照组无差异（P＞0.05），低、中、高剂量组之间BMD亦无差异（P＞0.05）；干预9周，低、中、高剂量组大鼠BMD均较对照组下降（P＜0.05），低、中、高剂量组之间BMD仍无差异（P＞0.05）；干预12周，低、中、高剂量组BMD均较对照组下降（P＜0.05），高剂量组BMD较低剂量和中剂量组下降（P＜0.05）。3.干预4周，低、中、高剂量组大鼠成骨细胞OCN mRNA、OCN蛋白、ALP mRNA、ALP蛋白表达水平与对照组无差异（P＞0.05），低、中、高剂量组之间OCN mRNA、OCN蛋白、ALP mRNA、ALP蛋白表达水平亦无差异（P＞0.05）；干预9周，高剂量组OCN mRNA、OCN蛋白表达水平较对照组下降（P＜0.01），低、中、高剂量组ALP mRNA、ALP蛋白表达水平较对照组下降（P＜0.01），低、中、高剂量组ALP mRNA、ALP蛋白表达水平无差异（P＞0.05）；干预12周，低、中、高剂量组OCN mRNA、ALP mRNA表达水平较对照组下降（P＜0.01），低、中、高剂量组之间OCNmRNA、ALP mRNA表达水平无差异（P＞0.05），低、中、高剂量组OCN蛋白、ALP蛋白表达水平均较对照组下降（P＜0.05），高剂量组低于低剂量和中剂量组（P＜0.05）。低、中、高剂量组干预4周、9周、12周OCN mRNA、OCN蛋白、ALP mRNA、ALP蛋白表达水平有差异（P＜0.05），随干预时间延长，OCN mRNA、OCN蛋白、ALP mRNA、ALP蛋白表达水平逐渐下降。4．干预4周，低、中、高剂量组LC3mRNA、Beclin1mRNA、Atg5mRNA表达水平与对照组无差异（P＞0.05），低、中、高剂量组之间LC3mRNA、Beclin1mRNA、Atg5mRNA表达水平亦无差异（P＞0.05）；低、中、高剂量组LC3蛋白、Beclin1蛋白、Atg5蛋白表达水平较对照组上升（P＜0.05），低、中、高剂量组之间LC3蛋白、Beclin1蛋白、Atg5蛋白表达水平无差异（P＞0.05）；干预9周，不同剂量组LC3mRNA表达水平较对照组无差异（P＞0.05），低、中、高剂量组Beclin1mRNA表达水平较对照组下降（P＜0.05），低、中、高剂量组之间LC3mRNA、Beclin1mRNA表达水平无差异（P＞0.05），高剂量组Atg5mRNA表达水平低于低剂量和中剂量组（P＜0.05），高剂量组LC3蛋白、Beclin1蛋白表达水平较低剂量组下降（P＜0.05），低、中、高剂量组之间Atg5蛋白表达水平无差异（P＞0.05）；干预12周，低、中、高剂量组LC3mRNA、LC3蛋白表达水平较对照组下降（P＜0.05），高剂量组LC3mRNA表达水平低于低剂量组（P＜0.05）。低、中、高剂量组Beclin1mRNA、Beclin1蛋白表达水平较对照组下降（P＜0.01），低、中、高剂量组之间Beclin1mRNA无差异（P＞0.05），高剂量组Beclin1蛋白表达水平低于低剂量和中剂量组（P＜0.05）。低、中、高剂量组Atg5mRNA、Atg5蛋白表达水平较对照组下降（P＜0.05），不同剂量组之间Atg5mRNA、Atg5蛋白表达水平无差异（P＞0.05）。低、中、高剂量组干预4周、9周、12周，LC3mRNA、LC3蛋白、Beclin1蛋白、Atg5mRNA、Atg5蛋白表达水平有差异（P＜0.05），随干预时间延长，LC3mRNA、LC3蛋白、Beclin1蛋白、Atg5mRNA、Atg5蛋白表达水平逐渐下降。低、中、高剂量组干预4周、9周、12周Beclin1mRNA表达水平有差异（P＜0.05），低、中、高剂量组干预9周、12周Beclin1mRNA表达水平较干预4周下降（P＜0.01），低剂量组干预12周较干预9周下降（P＜0.05）。5.电镜下，干预4周，低、中、高剂量组成骨细胞胞浆内自噬体数量增加，干预9周和12周，低、中、高剂量组的成骨细胞胞浆内自噬体数量减少，细胞空泡化明显。结论：1. GC可能以时间和剂量依赖的方式抑制骨形成,减少BMD；2. GC短期作用于成骨细胞，诱发成骨细胞自噬;随时间延长,自噬活性受抑制；3.成骨细胞自噬活性的改变可能参与GIOP的发生。