【摘 要】
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目的:评价中药消异育嗣汤对行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilizationembryo transfer,IVF-ET）助孕的肾虚血瘀型子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）患者临床疗效的影响,并从卵泡液色氨酸代谢通路角度探讨其作用靶点及可能的作用机制。方法:临床研究采用前瞻性随机对照研究方法,选取93例因不孕症于山东中医药大学附属医院生殖中心行IVF-ET的患者,
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目的:评价中药消异育嗣汤对行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilizationembryo transfer,IVF-ET）助孕的肾虚血瘀型子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）患者临床疗效的影响,并从卵泡液色氨酸代谢通路角度探讨其作用靶点及可能的作用机制。方法:临床研究采用前瞻性随机对照研究方法,选取93例因不孕症于山东中医药大学附属医院生殖中心行IVF-ET的患者,属于肾虚血瘀型EMs患者62例,将其随机分为中药消异育嗣汤干预组（TCM组）31例,未干预组（NON组）31例,另外单纯因男方因素治疗的正常对照组（CON组）31例。三组均采用Gn RH拮抗剂固定方案促排卵治疗,中药干预组从促排卵前一个月经周期开始服用消异育嗣汤至注射人绒毛膜促性激素（human chorionic gonadotropin,HCG）日。比较中药干预组和未干预组在用药前后中医证候积分变化;观察三组的IVF治疗结局:促性腺激素（gonadotropin,Gn）使用时间、Gn使用总量（IU）、HCG日E2（pg/m L）、P（ng/m L）和LH（IU/L）水平、获卵数、正常受精卵子总数、正常受精率、可移植胚胎数、优质胚胎数、优质胚胎率、阳性妊娠率、临床妊娠率、妊娠丢失率、异位妊娠率、取卵周期累计妊娠率。实验研究采用基于MRM方法的靶向代谢组学方法对三组患者取卵日的卵泡液进行色氨酸代谢通路分析,通过单变量统计分析和聚类分析方法筛选出显著性差异代谢物,并通过KEGG通路注释和分析相关代谢通路。结果:1.最终共89例患者完成临床研究,TCM组30例,NON组29例,CON组30例。2.三组患者的基础资料无显著性统计学差异（P均＞0.05）;与NON组及中药干预前相比,TCM组肾虚血瘀证候均显著改善（P均＜0.05）。3.三组间Gn使用时间、Gn使用总量、HCG日E2、P水平均存在显著性差异（P均＜0.05）,其中,TCM组HCG日E2、P水平均高于NON组;TCM组的可移植胚胎数、优质胚胎数及优质胚胎率均高于NON组（P均＜0.05）,且获卵数有增加趋势（P＞0.05）;三组取卵周期累计妊娠率比较有显著性差异（P＜0.05）,且TCM组较NON组有升高趋势（P＞0.05）。4.实验研究最终选取85个卵泡液样本。靶向代谢组学分析结果显示,本实验总共完成了19种色氨酸代谢物的鉴定,在NON组和CON组卵泡液中共发现6个差异代谢物,Tryptophan、kynurenate、Indole-3-carboxaldehyde、Indole-3-acetaldehyde、Indole-3-lactic acid等5种代谢物发生上调,N-formyl-kynurenine这种物质发生下调。5.中药消异育嗣汤干预后,在TCM组和NON组卵泡液中共发现4个差异代谢物:Cinnavalininate、Tryptophan、Indole-3-carboxaldehyde、3-Hydroxyanthranilic acid,其中Tryptophan在NON组vs.CON组和TCM组vs.NON组发生了显著相反的变化,KEGG分析显示,这些差异表现的代谢物主要涉及除色氨酸代谢通路以外3条通路:甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢通路;苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成通路;嘌呤代谢通路。结论:1.中药消异育嗣汤能够有效改善肾虚血瘀型EMs患者的临床症状及IVF治疗结局。2.Tryptophan、kynurenate、N-formyl-kynurenine及Indole-3-carboxaldehyde、Indole-3-acetaldehyde、Indole-3-lactic acid等与炎症、氧化应激相关的代谢物可能是肾虚血瘀型EMs的生物标志物。Tryptophan可能是消异育嗣汤的作用靶点。作用机制除涉及除色氨酸代谢通路以外,可能还与甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢;苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成;嘌呤代谢等通路有关。
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