本研究皆在体外细胞水平,通过RNA干扰技术抑制人宫颈癌细胞中热休克转录因子1(HSF1)的表达,探讨沉默HSF1基因后,对宫颈癌细胞辐射敏感性的影响。方法:构建pSilencerHSF1siRNA质粒表达载体,将构建好的质粒表达载体用脂质体转染入Hela细胞,实时荧光定量PCR检测HSF1 mRNA表达水平变化,用流式细胞仪检测HSF1蛋白表达的变化。克隆法检测HSF1基因沉默对Hela细胞辐射敏感性的影响。结果:通过双酶切鉴定和测序验证,成功构建了HSF1特异的siRNA质粒表达载体。实时荧光定量PCR验证:HSF1- pSilencer2.1-U6质粒表达载体对Hela细胞HSF1基因具有特异性阻断作用,其抑制效率为80-90%。流式细胞仪分析表明:质粒表达载体阻断HSF1基因表达后,HSF1蛋白表达下降明显。在HSF1基因沉默条件下,克隆法观察到转染后的细胞其细胞存活率比未转染的空白对照组明显降低。