论文部分内容阅读
目的：本研究通过检测盐酸博莱霉素（bleomycin.，BLM）诱导的大鼠肺纤维化模型在不同时间点肺组织中Th17细胞、CCR6、维甲酸受体相关孤儿受体(retinoid-ralatedorphan receptorγt，RORγt)，观察肺组织病理改变，探讨Th17细胞及其相关因子在肺纤维化发病中的可能机制。方法：将48只成年雄性SD大鼠，随机分为3组:生理盐水(N,n=18)组、BLM（B,n=18）组、地塞米松(D,n=12)组。NS组气管内灌注生理盐水，B组、D组气管内灌注BLM (BLM:5mg/Kg)，随后，在造模7天， N组和B组每日腹腔注射生理盐水，D组每日腹腔注射地塞米松注射液（1mg/kg）。各组大鼠分别于第7、14、28天处死。HE评价各组各时间点肺组织病理形态学变化并测肺组织匀浆中羟脯氨酸（hydroxyproline，HYP）含量；流式细胞计数检肺组织Th（T helper Th）17细胞;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测肺组织RORγtmRNA表达水平;免疫组化检测CCR6表达。结果：1、大鼠肺纤维化模型各组肺组织病理学变化：NS组大鼠各时间点肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及纤维化的形成。BLM组大鼠第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润，第14天时炎症细胞减少，肺泡间隔内成纤维细胞显著增多，肺泡结构破坏，第28天时肺纤维化程度进一步加重，形成广泛纤维化。与N组比较，B组、D组在个时间点肺泡炎显著加重(P＜0.05)；与B组比较，D组大鼠各时间点肺泡炎及纤维化程度明显减轻(P＜0.05)。2、肺组织羟脯氨酸(HYP)含量：盐酸博莱霉素模型组HYP，随造模时间的延长而逐渐增高；与N组比较，B组、D组在个时间点羟脯氨酸含量明显升高(P＜0.05)；与B组比较，在个时间点D组的羟脯氨酸含量明显降低(P＜0.05)。3、CD4~+IL-17+Th17细胞、CCR6、RORγtmRNA在大鼠肺组织的表达：B组肺组织的Th17细胞的百分率、CCR6、RORγtmRNA在不同时间点明显高于N组（P<0.05），数值以第7天最高，且呈逐渐降低的趋势，第28天时仍高于N组。D组与B组表现出相同的变化趋势，低于同期B组，高于N组，差异具有显著性（P<0.05）。结论：1、在本次研究中，使用博莱霉素诱导大鼠肺纤维化模型成功建立。2、Th17细胞及其相关因子CCR6、RORγt在大鼠肺纤维化模型中表达水平增加.3、Th17细胞及其相关因子CCR6、RORγt可能参与了盐酸博来霉素诱导的肺纤维化过程.