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目的利用重组腺病毒Ad-GFP-wnt3a和Ad-GFP-wnt3，分别转染小鼠肝前体细胞，使其获得高表达。通过观察比较高表达wnt基因的小鼠肝前体细胞上皮间质转化及迁移能力的变化，探讨wnt信号通路，在小鼠肝前体细胞上皮-间质转化中发生的作用。方法将表达wnt的腺病毒Ad-GFP-wnt3a,Ad-GFP-wnt3分别转入小鼠肝前体细胞中，与空白对照组相比，观察其形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察其对小鼠肝前体细胞迁移能力的影响。实时荧光定量Realtime-PCR和western-blot分别检测小鼠肝前体细胞中上皮标志物和间质标志物的表达改变。结果wnt3a诱导小鼠肝前体细胞发生上皮间质转化，提高其迁移能力1.镜下观察，高表达wnt3a的小鼠肝前体细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验结果显示，Ad-wnt3a组细胞48h迁移距离为（0.53±0.05）mm，Ad-GFP组细胞48h迁移距离为（0.33±0.02）mm，与空白对照组比较，实验组细胞迁移距离增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞迁移实验结果显示，Ad-GFP组24h穿过小孔的细胞为（10.33±2.08）个，而Ad-wnt3a组穿过的细胞为（62.00±3.60）个，相对空白对照组，其穿过小孔的细胞数量增加，差异具有统计学意义(P<0.01)。2.Realtime-PCR和Western-blot结果显示，Ad-wnt3a组细胞间质标志物N-cadherin、vimentin和snail的mRNA和蛋白水平表达均上调，而上皮标志物E-cadherin和CK18的mRNA水平和蛋白水平表达均下调,差异具统计学意义（P<0.05）。腺病毒Wnt3促进小鼠肝前体细胞发生上皮间质转化1.显微镜下可见，14-19细胞为不规则多边形，而高表达wn3的14-19细胞的形状为长梭形。细胞划痕实验和细胞迁移实验结果均显示，高表达wnt3的14-19细胞迁移能力明显提高，与空载体转染细胞相比，差异具统计学意义（P＜0.001）。2.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示，间质标记物N-cadherin、vimentin和twist1在mRNA和蛋白水平表达上调，相反上皮标记物E-cadherin在mRNA水平和蛋白水平表达下调，与空载体转染细胞相比，差异具统计学意义（P＜0.01）。结论1.成功构建高表达wnt基因的小鼠肝前体细胞株。2.wnt3a能诱导小鼠肝前体细胞发生上皮间质转化，并增强其迁移能力。3.wnt3能促进小鼠肝前体细胞发生上皮间质转化，并提高其迁移能力。4.wnt信号调控小鼠肝前体细胞的EMT转化过程，提示其可能参与肝纤维化的过程。