X染色体连锁基因RSK4在乳腺癌细胞株中的表达情况及相关研究

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目的:检测X染色体连锁基因RSK4(p90 ribosomal protein S6 kinase4)在四种常见人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、T47D、Bcap-37、MCF-7当中的表达差异,同时检测四组细胞株的体外侵袭力及迁移力,并分析RSK4基因与四组人乳腺癌细胞体外侵袭力、迁移力的关系,从而探讨RSK4基因对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:1、采用转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从mRNA水平检测RSK4在MDA-MB-231、T47D、Bcap-37、MCF-7四种人乳癌细胞株中的表达情况2、用Western-blot试验方法从蛋白水平检测RSK4在MDA-MB-231、T47D、Bcap-37、MCF-7四种人乳癌细胞株中的表达情况,对比PT-PCR的方法,分析两者的关系,进而筛选出RSK4高表达及低表达的两种细胞株3、用Transwell小室法来检测MDA-MB-231、T47D、Bcap-37、MCF-7细胞株的迁移、侵袭能力,分析其侵袭迁移能力与RSK4基因的关系。结果:1、RSK4 mRNA在MCF-7细胞中表达最高(0.816±0.014),Bcap-37次之(0.683±0.030),T47D较低(0.445±0.024),MDA-MB-231表达最低(0.280±0.008),四个细胞组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.001)。2、RSK4蛋白产物在MCF-7细胞中表达最高(0.850±0.068),Bcap-37次之(0.621±0.056),T47D较低(0.412±0.091),MDA-MB-231表达最低(0.222±0.030),四个细胞组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.001)。3、四个细胞组中RSK4 mRNA与RSK4蛋白的表达呈显著正相关(r=0.766,P<0.001)4、四个细胞组侵袭力、迁移力分别为:MDA-MB-231(52±6) (94±5); T47D(36±3)(82±3);Bcap-37(27±2)(71±2);MCF-7(18±3)(24±4),对细胞体外侵袭力和迁移力分别进行组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.001),并且四个组的侵袭力和迁移力呈正相关(r=0.822,P<0.001)。5、四组人乳腺癌细胞体外侵袭力随RSK4基因mRNA表达的增高而降低,呈负相关(r=-0.948,P<0.001);也随RSK4蛋白表达的增高而降低,呈负相关(r=-0.679,P<0.001)结论:1、RSK4在四种不同类型的人乳腺癌细胞中的表达高低顺序为: MDA-MB-231<T47D<Bcap-37<MCF-7.2、PT-PCR和Western-blot两种方法对RSK4进行检测具有较高的一致性。3、乳腺癌细胞体外侵袭力、迁移力高低顺序依次为:MDA-MB-231>T47D>Bcap-37>MCF-7.侵袭力和迁移力具有一定的相关性,均可以用来代表细胞体外的运动能力。4、RSK mRNA和RSK4蛋白的表达水平与乳腺癌细胞的侵袭力呈反比,说明RSK4与乳腺癌细胞的部分生物学行为有关,这为认识乳腺癌侵袭转移的分子机理提供有价值的实验依据,对评价乳腺癌细胞体外运动侵袭力方面有重要意义。
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