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大肠杆菌O157:H7是大肠杆菌的主要致病菌株，最早发现于1982年。感染大肠杆菌O157:H7主要引起婴幼儿腹泻、出血性结肠炎(HC)、溶血性尿毒综合症(HUS)、血栓性血小板减少性紫癜及死亡等。由于感染O157的病例导致2%～10%的死亡率，其高毒力日益被公众所关注。因此，建立快速、简便、灵敏度高和特异性强的检测方法对于大肠杆菌O157:H7的监控、检测具有重要的意义。免疫磁珠分离结合荧光胶乳免疫层析简单快捷灵敏度高，可实现定量或者半定量操作，不需增菌处理，不需复杂仪器，15分钟可得出结果，极适于现场检测。本研究成功研制了荧光胶乳免疫层析试纸条。用抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体标记荧光胶乳，用抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体作为检测线的捕获抗体，质控线用羊抗兔多抗IgG包被，筛选了合适的抗大肠杆菌O157:H7抗体，组装检测试纸条，同时对组装的试纸条进行条件优化，并检测其灵敏度、准确度、精密度及特异度等。本研究先讨论了免疫磁珠的合成的最佳条件，免疫磁珠富集菌液时的最佳工作浓度及捕获效率，最终建立免疫磁珠捕获菌液体系，利用建立的免疫磁珠分离与荧光胶乳免疫层析法制备大肠杆菌O157:H7检测试剂盒对模拟食物样本（包括维他奶、矿泉水和牛肉）进行检测，观测其检测结果及灵敏度。T线，C线荧光胶乳标记抗体最适稀释度分别为100倍，1000倍稀释，T线为0.1mg/mL，C线为0.5mg/mL条件下效果最佳，加样比例为1:1，试纸条最佳干燥时间为3天，15min左右能得到稳定的荧光值。用荧光胶乳免疫层析试纸条检测纯大肠杆菌O157:H7菌悬液时，检测灵敏度为105CFU/mL，特异性好，稳定性和重复性佳。免疫磁珠分离技术检测纯大肠杆菌O157:H7菌悬液时，菌体能捕获到90%以上，最佳偶联抗体缓冲液为pH=6.0的MES缓冲液，磁珠抗体最佳偶联质量比为3.3，最佳富集时间为30min。免疫磁珠分离结合荧光胶乳免疫层析联合检测模拟食物样本时，经过富集后可检测所有阳性样本，并将检测限下降到103CFU/mL。对于农贸市场、商场、出入境检验和食品加工业等需要现场快速检验的行业具有重要意义。