目的:痛风是一种由单尿酸钠结晶沉积而引起的炎性关节炎,近年来,随着饮食结构等因素的改变,发病率逐渐增高,已成为严重危害人类健康的疾病之一。别嘌呤醇作为临床治疗痛风的一线药物,自1963年用于治疗痛风性关节以来,疗效肯定。然而临床应用中发现别嘌呤醇的诸多不良反应,研究表明别嘌呤醇的过敏反应与HLA-B*5801基因有着密切的联系。因此,基因型的检测为于展开个体化用药,减少药物不良反应提供依据。本研究的目的在于研究制备一种靶向于HLA-B*5801多肽的单克隆抗体,鉴定其特异性和敏感性,并探讨其作为检测HLA-B*5801基因的单克隆抗体的检测抗体的可能性。方法:合成HLA-B*5801胞外段超变区域多肽,将该多肽作为抗原,免疫BALB/c小鼠,经细胞融合技术,产生融合的杂交瘤细胞,ELISA筛出分泌目的抗体特异性较高的细胞孔,经多次亚克隆,获得稳定分泌靶向于HLA-B*5801胞外段区域单克隆抗体的细胞株。常规方法制备腹水并用蛋白G柱亲和层析纯化该单克隆抗体,Western blot鉴定纯化抗体的纯度。倍比稀释法检测该单克隆的效价,单克隆抗体亚类检测试剂盒检测抗体的亚类,ELISA和Western blot检测其特异性。结果:经单克隆技术和亚克隆筛选获得稳定表达HLA-B*5801的单克隆抗体细胞株,经腹水法生产获得单克隆抗体,将该抗体命名为1E1、2A3,鉴定其亚类为IgGl、κ型,验证其抗体效价为1E1—1014,2A3—1010,并通过HLA-B*5801基因检测试剂盒筛选HLA-B*5801阳性患者及阴性患者,通过ELISA及Western blot鉴定该抗体特异性结合HLA-B*5801蛋白,筛选阳性及阴性患者。结论:筛选所获得的亚克隆抗体,经ELISA和Western blot验证,其可特异性的与HLA-5801多肽结合,并具有较高的效价,提示该抗体可作为临床筛选对别嘌呤醇过敏的痛风患者。