目的:检定在人肝细胞癌细胞中,抑制KCTD10蛋白的表达能否影响肝癌细胞的干细胞样特性及其分子机制。方法:使用包装KCTD1O siRNA序列的慢病毒感染人肝癌细胞系Hep3B细胞和MHCC97H细胞,qPCR和蛋白质印迹(WB)的方法确认抑制效果。肿瘤球形成实验、平皿集落形成实验、细胞增殖实验和划痕实验分析抑制KCTD10表达对肝癌细胞体外致瘤性、自我更新能力和细胞体外迁移能力的影响。分别用qPCR、WB实验和荧光抗体标记流式细胞实验检测干细胞标记基因以及Notch信号通路的影响。结果:转染包装了 KCTD10 siRNA序列的慢病毒可以有效抑制Hep3B和MHCC97H细胞中KCTD10mRNA和蛋白含量;抑制KCTD1O的表达可以增加肿瘤球形成率、平皿集落形成能力,增强细胞增殖速率、细胞体外迁移能力,并增强肝癌干细胞标记基因CD133、OCT4以及Bmi1基因的mRNA水平,以及肝癌干细胞标记基因多能转录因子Nanog、乙醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)蛋白水平;增加肝癌细胞中CD133+细胞比例。同时,抑制KCTD10蛋白的表达可以影响Notch信号通路的表达调控。结论:1.抑制Kctd10基因表达可以增强肝癌细胞致瘤性。2.抑制Kctd10基因表达可以增强肝癌干细胞特性。3.在肝癌细胞中抑制Kctd10基因表达能影响Notch信号通路的表达调控。