论文部分内容阅读
背景急性心肌梗死(AMI)后持续的心肌缺血、神经内分泌路径的激活、炎症反应和心脏超负荷,引起心肌细胞坏死、凋亡和心室重塑,是心力衰竭和心律失常的形成重要原因。因此,减少心肌细胞凋亡、调节神经内分泌细胞因子系统、抑制炎症反应以改善心室重塑就成为有效治疗心肌梗死、防治心衰和心律失常的主要机制之一。核转录因子-κB (NF-κB)是广泛存在的调节细胞基因转录的关键因子之一。近年来研究表明,心血管系统中亦存在NF-κB激活通路,可以调节凋亡相关基因(bcl-2/bax、Capase3、p53等)、致炎症细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-6等)、黏附分子(ICAM-1、VCAM-1)、基质金属蛋白酶(MMPs)等,从而影响心肌细胞的损伤和凋亡。由此可见,NF-κB通路在AMI后的细胞凋亡、炎症反应和心室重塑中起着重要的作用。骨髓间充质干细胞(MSCs)是一类具有强大增殖能力和多向分化潜能的干细胞,在特定的环境下除了可以向心肌细胞分化外,尚能分泌大量的生长因子和细胞因子,还可以通过上调bcl-2基因的表达干预心肌细胞凋亡影响心功能,但MSCs移植治疗AMI是否通过影响NF-κB而起作用依然不明。迄今,尚未见国内外有关MSCs移植对心肌梗死后NF-κB信号途径影响的文献报道。目的探讨急性心肌梗死(AMI)后心肌组织中NF-κBp65、bax、 TNF-α-mRNA表达、心肌细胞凋亡的变化以及骨髓间充质干细胞移植对其产生的影响。方法本研究是在师兄前期实验用家兔建立心肌梗死模型,并完成了骨髓间充质干细胞培养和干细胞移植到实验家兔心肌的基础上,利用该模型心肌组织[正常组(Nor组)、假手术组(SH组)、心肌梗死组(MI组)、MSCs移植组(MSCs组)]以免疫组化法检测NF-κBp65和Bax蛋白表达,TUNEL法进行心肌细胞凋亡原位检测,原位杂交法检测TNF-αmRNA在心肌组织的表达。结果(1)免疫组化法检查NF-κBp65、Bax蛋白的表达Nor组和SH组NF-κBp65、Bax蛋白均表达低下,与Nor组和SH组比较,MI组和MSCs组的心肌梗死边缘区NF-κBp65、Bax均表达明显增加(p<0.001)；与MI组比较,MSCs组两者均表达减少(p<0.001)。(2)原位杂交法检测TNF-αmRNA与Nor组和SH组比较,MI组和MSCs组TNF-αmRNA表达增加(p<0.001); MSCs组较MI组表达减少(p<0.001)。(3) TUNEL(?)去检测心肌细胞凋亡MI组和MSCs组心肌细胞凋亡指数显著大于正常组和假手术组(p<0.001); MSCs组心肌细胞凋亡指数显著小于MI组(p<0.001)。结论心肌梗死后NF-κB信号途径激活,NF-κBp65、Bax、 TNF-αmRNA表达上调,心肌细胞凋亡增加；同种异体MSCs移植后能够抑制该信号途径的活化,下调NF-κBp65、Bax、TNF-αmRNA表达,减少心肌细胞凋亡。