山茱萸(Cornus officinalisSieb.etZucc.)为山茱萸科(Cornaceae)山茱萸属(Cornus)多年生木本植物,以其干燥、成熟去核果肉入药,性酸,微温,归肝、肾经。研究发现,山茱萸具有收敛固涩、补益肝肾的疗效,是一种常见的滋补类中药,古方中多与其他药物配伍治疗“消渴症”。现代药理学研究表明,山茱萸在抗氧化、抗炎、降血糖和降血压等方面具有良好作用。结合现有文献,推测山茱萸在改善胰岛素抵抗方面可能有巨大潜力,故本实验在结合前人研究成果的基础上,初步较为系统的探究了山茱萸乙醇提取液(FC)对胰岛素抵抗小鼠的改善情况。本实验采用中药山茱萸果肉,经纳米粉碎后与53%的乙醇按1:25的比例混匀,置于超声仪中50℃下超声19min,重复5次,得到山茱萸乙醇提取液。冷冻干燥处理后得到浸膏,使用时将浸膏用蒸馏水配制成100、200、400mg/kg 3种给药剂量。胰岛素抵抗模型小鼠由一定比例的高脂高糖饲料结合低浓度(15%)果糖溶液诱导而成。阳性对照药为二甲双胍(150mg/kg)。将实验小鼠划分为6组。正常组小鼠给予标准动物饲料和蒸馏水;模型组则给予低浓度的果糖水及高脂高糖饲料。给药组在喂食果糖水及高脂饲料的同时,每日灌胃相应浓度和种类的药品。其余组灌胃等量蒸馏水。本实验主要研究结果如下:(1)采用高脂高糖饲料并配合低浓度果糖饮用水的方法能成功建立小鼠胰岛素抵抗模型。该方法操作简单、成模稳定。与正常组相比,模型组小鼠呈现肥胖体征。与此同时,模型组小鼠还出现了高血糖、高胰岛素血症,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、游离脂肪酸(FFA)水平升高,符合常规实验中对个体胰岛素抵抗的判定标准;同时模型组小鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL)水平降低,综上表明其糖脂代谢系统受损。此外,模型组小鼠肝脏病理切片证明其脏器水平已受到损害。(2)山茱萸提取物(FC)能显著缓解胰岛素抵抗小鼠的机体肥胖状态。同时有效降低随机血糖、血清胰岛素、TC、TG、和LDL,同时升高HDL浓度。这些参数表明FC有助于恢复IR小鼠机体中糖脂代谢的平衡;利用HOMA-IR/ISI公式评估结果显示FC能有效缓解IR小鼠的胰岛素抵抗状态。HE染色结果显示FC能缓解因IR导致的肝脏组织受损。在以上指标中FC的改善作用均呈剂量依赖性。(3)在胰岛素介导的PI3K/AKT信号传递途径中,经FC治疗后的IR小鼠肝脏组织中InsR、IRS、PI3K、AKT、GLUT4的mRNA和蛋白表达显著上升,同时骨骼肌组织中GLUT4和PI3K的蛋白表达量也呈上升趋势。说明FC可能通过直接或间接作用来提高胰岛素介导的靶组织信号通路中主要蛋白的生物活性,推测可能是提高了关键蛋白的相关亚基的磷酸化水平。本实验从整体水平到蛋白水平逐步分析了山茱萸醇提物对IR小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并对其主要机制进行了初步探究,为山茱萸的深入研究和开发利用提供了理论依据。