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目的:本研究旨在观察血浆microRNA-223的表达水平与急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)患者血小板反应性的关系,评价其在氯吡格雷高血小板反应性(high on-treatment platelet reactivity,HTPR)中的预测价值,并探讨血浆microRNA-223的表达水平及CYP2C19基因多态性的关系。方法:连续纳入2017年11月-2018年11月在天津医科大学第二医院神经科住院的AIS患者和对照组,记录临床资料及各项实验室检验和检查结果。应用流式细胞仪检测血小板内的肌动调节蛋白-血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator stimulated phosphoprotein,VASP)磷酸化水平和二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率(ADP induced platelet aggregation,ADP-PAg)的方法来评估血小板反应性,并采用实时荧光定量PCR检测血浆microRNA-223的表达水平,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法对CYP2C19功能缺失性(loss-of-function,LOF)等位基因进行分型(常见多态位点*2(G681A)和*3(G636A))。对照组患者入院时以VASP法检测血小板聚集率并测定血浆microRNA-223的表达水平。AIS组患者同时采用ADP-PAg和VASP两种方法检测氯吡格雷治疗前和治疗7±1天后的血小板聚集率,然后根据ADP-PAg方法算出的血小板相对抑制率(Relative Inhibition,RI),以分位数形式分组,上四分位数为氯吡格雷高反应组(氯吡格雷非HTPR组)和下四分位数为氯吡格雷低反应组(氯吡格雷HTPR组),最后对AIS患者进行用药前后血浆microRNA-223表达水平的检测和CYP2C19基因型测定。以3月末改良的Rankin评分评估患者的临床转归。采用非条件Logistic回归分析血浆microRNA-223表达水平与AIS患者氯吡格雷HTPR的相关性,采用受试者工作特征曲线分析血浆microRNA-223的表达水平对AIS患者氯吡格雷HTPR及AIS患者临床转归不良的预测价值。结果:(1)应用ADP-PAg和VASP两种方法检测血小板聚集率的120例患者中发现用药前后VASP-PRI与ADP-PAg均呈正相关(用药前:r=0.190,P=0.037;用药后:r=0.323,P<0.001)(2)AIS组用药前血浆microRNA-223表达水平和用药前VASP-PRI均高于对照组(用药前miR-223:1.254±0.80vs1.001±0.51,P=0.041;用药前VASP-PRI:66.23±11.32vs 34.77±10.69,P<0.001)。Logistic回归分析显示用药前VASP-PRI升高与AIS风险增高有关(OR1.011,95%CI1.004-1.019,P=0.002)(3)在根据RI的四分位法筛选出的60例AIS患者中,用药后microRNA-223表达水平与用药后VASP-PRI呈负相关(r=-0.304,P=0.018)(4)AIS患者氯吡格雷HTPR组用药前后血浆microRNA-223表达水平均低于非HTPR组(用药前miR-223:1.033±0.910 vs 1.575±0.536,P=0.032;用药后miR-223:0.521±0.379 vs 0.676±0.328,P=0.034),Logistic回归分析显示用药前后血浆microRNA-223表达水平降低均与AIS患者氯吡格雷HTPR的风险增加有关(用药前miR-223:OR 2.219,95%CI 1.030-4.781,p=0.042;用药后miR-223:OR 5.109,95%CI 1.082-24.133,p=0.039)。ROC曲线结果显示:AIS患者用药前血浆microRNA-223表达水平小于1.185容易发生氯吡格雷HTPR。将血浆microRNA-223表达水平以1.185为界分组分析,发现与microRNA-223表达水平升高组(≥1.185)组相比,microRNA-223表达水平降低组(<1.185)CYP2C19LOF等位基因携带人数多,但差异未达到统计学差异(P>0.05)(5)通过非条件Logistic回归的交互功能分析,用药前血浆microRNA-223表达水平与是否携带CYP2C19LOF等位基因之间存在交互作用(OR 3.750,95%CI 1.078-13.039,p=0.038),用药后血浆microRNA-223表达水平与是否携带CYP2C19LOF等位基因之间不存在交互作用(OR 1.266,95%CI 0.297-5.399,p=0.750)。以CYP2C19LOF等位基因携带状态分组后发现在CYP2C19LOF等位基因携带者中,氯吡格雷HTPR组血浆microRNA-223的表达水平低于非HTPR组,且有统计学意义(P<0.05)。而在CYP2C19 LOF等位基因非携带者中,血浆microRNA-223的表达水平与氯吡格雷HTPR无明显关系(P>0.05)(6)用药前后血浆microRNA-223表达水平降低均与临床转归不良的风险增高有关(用药前miR-223:OR 1.929,95%CI 1.250-2.976,P=0.003;用药后miR-223:OR 3.079,95%CI 1.360-6.969,P=0.007)。ROC曲线结果显示:AIS患者用药前血浆microRNA-223表达水平降低可较好地预测临床转归不良,低于1.148容易出现转归不良(最佳cutoff值1.148,曲线下面积为0.878),用药后血浆microRNA-223表达水平低于0.633容易出现转归不良(最佳cutoff值0.633,曲线下面积为0.776)。结论:用药前血小板聚集率的升高增加AIS风险。AIS患者用药前后血浆microRNA-223表达水平降低增加氯吡格雷HTPR的风险,而用药前后血浆microRNA-223表达水平降低与临床转归不良的风险增高有关。CYP2C19 LOF等位基因与血浆microRNA-223表达水平存在交互作用,CYP2C19 LOF等位基因携带可能使血浆microRNA-223的表达差异更明显。研究提示联合检测血浆microRNA-223与CYP2C19基因多态性,可能更加有效地预测AIS患者氯吡格雷HTPR的发生,同时为今后临床抗血小板药物个体化治疗的研究提供客观依据。