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酶联免疫分析技术具有灵敏度高、特异性强、操作简便、适宜现场监控和大量样品的筛选等优点,在农药残留快速检测中发挥着重要的作用。本论文以烯唑醇和烯效唑为研究对象,对其酶联免疫分析方法进行了深入系统的研究,主要研究结果如下：对烯唑醇和烯效唑的结构进行修饰,分别和琥珀酸酐反应合成了烯唑醇半抗原和烯效唑半抗原,采用碳二亚胺法将半抗原和牛血清蛋白(BSA)偶联制备了免疫抗原,采用混合酸酐法将半抗原与卵清蛋白(OVA)偶联制备了包被抗原。经紫外光谱分析证明成功合成了免疫和包被用人工抗原,烯唑醇免疫原和包被原的结合比分别为27：1和9：1,烯效唑免疫原和包被原的结合比分别为17：1和5：1。用免疫抗原免疫雄性新西兰大白兔,分别获得了针对烯唑醇和烯效唑的特异性抗血清,用辛酸-硫酸铵法分离纯化抗血清,冷冻干燥后获得抗烯唑醇抗体和抗烯效唑抗体,用间接非竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定烯唑醇和烯效唑抗体的效价分别达到2.56×105和1.02×106。通过研究甲醇含量、离子强度、pH值对抗原抗体反应灵敏度的影响,优化了烯唑醇间接竞争酶联免疫吸附测定(ic-ELISA)的分析条件,确定了20%甲醇、0.4mol/L Na+强度、pH 7.5为烯唑醇ic-ELISA的最佳工作条件。利用优化后的分析条件,用ic-ELISA法进行了方法的精密度、抗体亲和性和特异性研究,结果表明得到的抗体对烯唑醇有较高的亲和性和特异性,方法的精密度也符合农残分析的要求。该方法的IC50为0.071±0.013mg/L,检出限(IC10)为1.28±0.8μg/L,线性检测范围为0.005-5mg/L。平均板内变异系数在1.82%-4.48%之间,板间变异系数在3.22%-8.74%之间。在交叉反应测定中,除烯效唑有一定的交叉反应外,与三唑类杀菌剂戊唑醇、已唑醇、三唑酮、粉唑醇、氟环唑、环唑醇都没有明显的交叉反应。对烯效唑ic-ELISA的分析条件进行了优化,确定了20%甲醇、0.3mol/L Na+强度、pH 7.5作为分析的最佳工作条件。在优化条件下,该方法的线性范围为0.005-10mg/L, IC50为2.26±0.5mg/L,检出限为1.82±0.83μg/L。平均板内变异系数在1.82%-5.05%之间,板间变异系数在1.93%-7.49%之间,方法的精密度较好。制备的抗烯效唑抗体除与烯唑醇有一定的交叉反应外,与戊唑醇、已唑醇、三唑酮、粉唑醇、氟环唑、环唑醇交叉反应较小。以建立的烯唑醇ic-ELISA分析方法,考察了不同样品基质对ELISA测定的影响,样品经过简单的提取净化步骤,最终提取物用缓冲液稀释1-4倍之后,样品中的基质基本不影响测定,可用于水、土壤、梨、葡萄、番茄、面粉等样品的检测,添加浓度为0.005mg/L(mg/kg)-0.5mg/L(mg/kg),测得添加回收率在70%-120%之间,变异系数在0.33%-10.42%之间。用建立的烯效唑ic-ELISA分析方法测定了水和土壤中的烯效唑残留量,添加浓度为0.005mg/L(mg/kg)-0.5mg/L(mg/kg)之间时,添加回收率在82.40%-105.92%之间,变异系数在0.29%-8.52%之间。建立的方法均符合农药残留分析的要求,适用于大量样品和现场的快速检测,为开发残留检测试剂盒及三唑类的ELISA分析奠定了理论基础。