兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)发酵生产透明质酸工艺条件研究

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本文以兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)为菌种,进行透明质酸发酵条件研究。首先进行摇瓶发酵条件的优化,包括摇瓶培养温度、pH、装液量、发酵时间的优化;其次进行摇瓶发酵培养基的优化实验,通过响应面法分析得到主效成分葡萄糖和酵母膏的最佳浓度;最后对透明质酸小型发酵罐的发酵条件进行研究,通过上述实验旨在为透明质酸进一步的大规模生产提供参考,具体结果如下:1、为了进一步提高兽疫链球菌发酵生产透明质酸产量,通过控制温度、pH、发酵时间、装液量来优化摇瓶发酵条件。通过单因素试验得出最适pH,最适温度,最适发酵时间,最适装液量。摇瓶培养在36℃下菌体量最多,在37℃下透明质酸产量最高;在pH7.0时菌体量及透明质酸产量都达到最高;发酵时间在24h是透明质酸产量最高,菌体量最多;装液量在40%时,.透明质酸产量最高,菌体量最多。2、利用Plaekett-Burman设计及响应面分析法(RSM)对透明质酸产生菌摇瓶发酵培养基进行优化,确定了影响透明质酸产量的关键因子为葡萄糖和酵母膏,经过分析得到葡萄糖最佳浓度为55.78g/L,酵母膏最佳浓度为23.43g/L。通过对培养基的优化,透明质酸产量得到提高,实验值与预测值基本一致。3、试验在5L发酵罐中,通过不同通气量、不同搅拌转速以及不同发酵温度进行透明质酸发酵单因素试验,结果表明:小型发酵罐透明质酸发酵最佳通气量为3L/min,搅拌转速为200r/min,最适宜温度采用分段控制,发酵前18h控制在36℃,18h后升温至37℃发酵至28h,透明质酸产量较优化前有显著提高。
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