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红细胞(RBC)储存是保证红细胞临床用血充足和安全的前提。然而,研究证实:红细胞在储存过程中发生了一系列形态学和理化性质等方面改变,其程度随着红细胞储存时间的延长而日渐明显;这种改变被称为红细胞储存损伤,并可能在一定程度上对于受血者产生不利影响。因此,近二十多年来红细胞储存损伤逐渐成为输血医学领域研究的重点。2015年,56个临床回顾性研究与8个随机对照研究的分析结果不但缺乏一致性;并且没有将输血不良反应作为研究终点。本研究将在课题组前期工作的基础上,第一部分从回顾性临床研究入手分析了临床输血不良反应发生的总体特点,并对红细胞储存时间与输血不良反应发生率的关系进行了初步分析。第二部分借鉴动物实验的感染模型来分析红细胞储存时间对于感染大鼠输注效果的影响。一、回顾性临床研究目的:调查成都市一家三甲综合医院7年来输血不良反应的发生情况,并分析红细胞储存时间与输血不良反应的相关性,为深入研究输血不良反应发生的相关因素提供参考。方法:通过查询成都市一家三甲综合医院近7年来不良反应回报单和输血不良反应记录,医院电子病历的输血管理系统以及患者病历等资料,获取并完善349例输血不良反应病历的具体信息。具体包括:不良反应发生日期、反应类型;血制品类型、剂量、血袋号和有效期;患者性别、年龄、科室、疾病类型、输血或妊娠生育史;处理方式和处理结果;通过电子病历的输血管理系统统计出25803例悬浮红细胞的有效期和输注日期。结果:2010年以来,从该院输血不良反应发生率来看,总体发生率为2.38±0.86‰(349 次/151605U);血小板为 5.64‰,红细胞为 3.17‰,血浆为 1.28‰,冷沉淀为0.94‰。在非溶血性发热反应中RBC占64%(172/212);过敏反应中血浆占38.1%(40/105),血小板占28.6%(30/105);消化内科和血液内科分别占输血反应总数的32%和21%(110/349和72/349);消化道出血患者发生的不良反应中RBC占为93%(63/68);肝病患者发生的不良反应中血浆占71%(17/24);白血病患者发生的不良反应中血小板占57%(20/35)。悬浮红细胞占所有血制品使用总量的45.31%,其引起的输血不良反应占比为64%。储存期在第1、2、3和第4周的悬浮RBC不良反应发生率分别为5.66‰、4.49‰、3.65‰和 4.89‰。二、动物实验目的:探讨红细胞储存时间对大肠杆菌感染大鼠输注效果的影响;方法:将69只SPF级SD大鼠,根据是否使用免疫抑制剂(环磷酰胺和地塞米松)和输注RBCs的储存时间不同,随机分成2个实验组:免疫抑制+9 dRBCs组、免疫抑制+1 d RBCs组。1个对照组:免疫抑制+生理盐水(NS)组;一个空白组:单纯NS组;三免疫抑制组各为18只大鼠,空白组15只。每只大鼠经股静脉放出全身20%血液后,分别输注与失血量相同的储存9或1d的浓缩RBCs及等量NS,随后植入大肠杆菌溶液0.5ml,并连续观察7d。术后24 h,取尾静脉血用亚铁嗪微板法测定血清铁,并用LB培养基进行血细菌培养15 h后用紫外分光光度计测定OD600;术后24h处死各免疫抑制组大鼠3只/组,取组织做病理检查。结果:3个免疫抑制组分别输注9d、1d RBCs和NS后的大鼠死亡率分别为10/15,11/15和9/15(P>0.05),死亡大鼠的平均生存时间(h)分别为55.6±21.3、38±16.6 和 28.3±15.0(P<0.05);24h 后血清铁离子浓度(μmol/L)分别为 34.1±9.8,28±10.2,26.8 ± 9.0 和 22.4 ± 5.9(P>0.05);血培养的结果(OD=600nm)分别为 0.510±0.340,0.790±0-281,0.427±0.107 和 0.349±0.069(P<0.05);24 h回肠组织细菌计数(个/1000倍视野)分别为44±9,101±7 和 27±8(P<0.05)。结论:1、在所有血液成分中,悬浮红细胞不仅临床用量最多,而且其引起的输血不良反应数量也最多。2、RBC发生的输血不良反应以非溶血性发热为主,其他血液成分以过敏反应为主;3、随着悬浮RBC储存时间的延长,其输血不良反应的发生率出现先降低后升高的趋势。4、输注不同储存时间的红细胞对大肠杆菌感染的免疫抑制大鼠死亡率没有明显影响;5、相比储存时间长的红细胞,新鲜红细胞促进了免疫抑制大鼠体内大肠杆菌的增值;并加速了感染大鼠的死亡。