灰盖鬼伞菌与球托霉菌相互作用合成漆酶机制研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiuzhizhedetiantang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,在现代工业生物技术领域具有广泛的应用价值。真菌相互作用可以促进漆酶合成菌大量合成漆酶。研究相互作用过程中漆酶上调表达机制,可以为通过微生物相互作用途径生产漆酶提供理论依据,同时也可以为真菌间相互作用研究提供借鉴。然而,真菌相互作用诱导漆酶上调表达的机制目前尚不清楚。本文以模式真菌灰盖鬼伞菌Coprinopsis cinerea strain Okayama7(#130)为漆酶分泌菌,通过筛选、优化建立真菌相互作用诱导漆酶合成研究体系,并以此为基础,在生理生化水平及全RNA水平研究探讨了相互作用诱导漆酶合成可能的表达机制,获得的主要研究结果如下:   1.以模式菌株C.cinerea为漆酶合成菌,通过功能平板对峙培养,从候选相互作用真菌中筛选得到诱导菌Gongronella sp.w5;以碳源、氮源、接种量等为影响因素,漆酶活力为考察指标,对相互作用诱导漆酶合成的液态发酵培养基进行了优化。结果显示,以蔗糖为碳源、DL-天冬酰胺为氮源、Gongronella sp.w5接种量为2.5%(v/v)时,相互作用体系中漆酶活力最高,达到1800 U/L,是C.cinerea纯培养体系中漆酶活力(2 U/L)的900倍,而Gongronella sp.w5纯培养无漆酶合成;相互作用体系与化学诱导纯培养体系中漆酶同工酶谱存在差异,表明两种方式中漆酶表达机制存在差异。   2.通过系列摇瓶发酵实验考查了菌丝体的物理接触、可溶性次级代谢产物、碳源代谢等因素对漆酶合成的影响。结果显示,Gongronella sp.w5与C.cinerea之间菌丝的直接接触对漆酶基因上调表达无显著影响;可溶性的化学分子可能是诱导漆酶基因上调表达的主要原因;然而,活性分子的漆酶诱导活性必须依赖于Gongronella sp。w5的存在,因为在纯培养体系中,C.cinerea无法代谢利用蔗糖,菌丝细胞处于休眠状态。在相互作用体系中,Gongronella sp.w5是蔗糖的分解者,其分解蔗糖生成果糖和葡萄糖,供C.cinerea竞争利用,从而改变C.cinerea的基因表达模式,使菌丝细胞处于活跃状态,表现为生物量的增加等,为漆酶合成提供基础。   3.通过透析袋隔离培养实验成功模拟了相互作用环境,并克服真菌相互作用研究过程中菌丝体相互缠绕、无法获得单一菌丝体的瓶颈,制备获得C.cinerea菌丝体;构建C.cinerea基因表达谱文库并进行数字化基因表达谱测序。结果分析显示,Gongronella sp.w5与C.cinerea相互作用合成漆酶的过程中,C.cinerea基因组中参与碳源代谢、氨基酸代谢、脂类代谢、异生化合物代谢途径的基因发生大量差异表达,为生理生化水平上获得的漆酶上调表达机制提供了分子水平的证据,同时提示相互作用体系中金属离子在漆酶基因上调表达中可能发挥作用,为下一步深入的机制研究奠定基础。而且,本实验结果为微生物间攻击与防御等行为研究提供了借鉴。
其他文献
膜结合蛋白是生物体内一类数量众多,功能重要的蛋白类型,其通过与细胞质膜的动态结合,参与细胞信号调节等重要的生物事件。已有的研究表明,膜结合蛋白主要通过电荷相互作用,疏水相
钙钛矿氧化物具有稳定的晶体结构和良好的热稳定性,并且具有许多独特的性质:电导性、超导性、铁电性、压电性、介电性、电光性和磁性,是当前极具发展前景的新型功能材料之一。钛
能源危机和环境污染两大问题已经成为制约全球经济发展的瓶颈,而照明用电约占世界能源消耗的20%。LED因其环保、清洁、长寿、节能等众多优点成为照明事业的新星。LED是低压直流驱动的冷光源,它的性能受到环境的制约,其驱动电源的优劣是影响LED产品的可靠性的关键问题。本文针对LED工作电流的特性,设计一个可以与外界通信管理的,输出电流可调的LED数字驱动电源。论文介绍了LED照明的优势和广阔前景,以及L
随着3G网络建设的展开,移动用户数量逐渐增加,用户和运营商对网络的质量和覆盖要求也越来越高。而在实际工作中,基站成本在网络投资中占有很大比例,并且基站选址是建网的主要
微囊藻毒素(microcystins,MCs)是一类由某些淡水蓝藻产生的环七肽肝毒素,近年来由于水体富营养化和全球气候变暖等因素蓝藻水华在世界范围内频发而受到广泛关注。由于具有分布
单宁酰基水解酶(Tanninacylhydrolase,E.C.3.1.1.20),单宁酶(Tannase,EC3.1.1.20)是一种水解酶,可水解植物次生代谢产物单宁酸,裂解其中的酯键和缩酚酸键,生成没食子酸和其他化合物
异果菊又名绸缎花,为菊科异果菊属多年生草本,自基部分枝,多而披散,枝叶有腺毛。叶互生披针形,叶缘有深波状齿,茎上部叶小,无柄。头状花序顶开舌状花,黄色、橙黄色或白色。瘦
2013年10月19日,由中国美术家协会、中国国家画院、人民大会堂事务管理局、陕西省委宣传部主办的“王西京为人民大会堂创作暨捐赠巨作《黄河,母亲河》座谈会”在北京人民大会
当代科学技术的迅猛进步极大地促进了各类医疗电子设备的发展,各种便携式、智能化的人体健康状况监护设备不断出现。论文提出了基于嵌入式操作系统Windows CE和AT91SAM9261微
利用分辨率较高的SINTEX-F(Scale INTeraction EXperiment-FRCGC)海气耦合模式,进行多组长时间积分模拟和理想试验,分析研究热带印度洋海气耦合对夏季大气环流气候态的影响.