热化疗抑制肝癌细胞SMMC-7721生长的实验研究

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目的:探讨热化疗对体外肝癌细胞株的抑制作用及其可能的作用机理,同时观察正常原代人肝细胞对热化疗(thermochemotherapy)的耐受情况。方法:胶原酶法体外分离培养人原代肝细胞,分别于43℃、30分钟+顺铂1.0ug/ml;43℃、60分钟+顺铂1.0ug/ml;43℃、90分钟+顺铂1.0ug/ml热化疗剂量下24、48、72小时连续处理人原代肝细胞,光学显微镜下观察细胞形态变化并用连续检测法检测肝细胞培养液ALT值,探索人肝细胞能耐受的热化疗剂量,运用该剂量处理人肝癌细胞系SMMC-7721,光镜、电镜下观察肿瘤细胞形态和超微结构变化,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测处理后的肝癌细胞活度;流式细胞仪测定细胞周期。结果:(1)在43℃、30分钟+顺铂1.0ug/ml和43℃、60分钟+顺铂1.0ug/ml的热化疗剂量条件下肝细胞生长轻度受抑,培养液ALT值短暂轻度升高;而在43℃、90分钟+顺铂1.0ug/ml剂量处理时可见肝细胞明显破坏,培养液ALT值持续升高;(2)43℃、 60分钟+顺铂1.0ug/ml热化疗剂量处理人肝癌细胞系SMMC-7721,光镜、电镜及MTT法观察到其生长明显受抑,且抑制程度较单纯热疗或单纯化疗均更明显(P﹤0.05);(3)流式细胞仪检测热化疗组细胞显示:S期细胞减少,G1期细胞增多。结论:(1)人原代肝细胞对43℃、60分钟+顺铂1.0ug/ml热化疗剂量有良好耐受作用;而同等热化疗剂量可以明显抑制人肝癌细胞系SMMC-7721的生长;(2)热化疗对肝癌细胞抑制作用较单纯热疗或单纯化疗均更为明显;(3)多次重复热化疗处理人肝癌细胞系SMMC-7721较单次处理具有更明显抑制作用;(4)影响肝肿瘤细胞周期是热化疗抑制体外肝癌细胞生长的机理之一;(5)热化疗还可能通过启动凋亡程序抑制肝肿瘤细胞生长。
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