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研究背景银纳米颗粒(Silver nanoparticles,AgNPs)是粒径处于纳米级的金属银单质,因其具有非常小的尺寸,使之具有独特的物理化学性质,如抗菌活性、导电性、催化活性,从而使银纳米颗粒具有一些特殊的用途,如电化学应用、医学应用、废水处理等。目前,主要可利用物理、化学和生物三种方法来制备银纳米颗粒,而绿色化学工程的理念、生物安全性材料的发展,使得生物方法制备银纳米颗粒成为研究热点和现实需要。橙汁是一种来源广泛、可食用的安全原材料,本研究利用橙汁提取物中所含糖类、酚类、酮类等成分作为硝酸银的还原剂和银纳米颗粒的封端剂,并对其制备过程中的pH值、温度、反应时间等条件进行了探索与优化,设计出一种安全、高效、可控的银纳米颗粒生物制备方法,并对此生物制备的银纳米颗粒进行表征、生物相容性及抗菌性等进一步研究。研究内容第一章 银纳米颗粒的制备和表征[目的]本研究旨在对利用橙汁提取物生物制备银纳米颗粒的工艺进行探索优化,并对不同条件下制备出来的银纳米颗粒进行表征。[方法]利用橙汁提取物在不同pH条件、反应时间、温度条件下从硝酸银中还原出银纳米颗粒,利用高速离心机收集银纳米颗粒,采用紫外可见光谱分析产量的多少、马尔文激光粒径仪对材料粒径和表面电荷进行表征。采用透射电子显微镜(TEM)观察制备出的银纳米颗粒的粒径大小、形状与晶格结构。[结果]在pH=8.0、0℃、反应时间为4h条件下银纳米颗粒产量最高。制备的银纳米颗粒呈球形或椭球形,平均粒径为15.54 nm,Zeta电位为-34.46,分散良好。[结论]利用橙汁提取物在pH=8.0、0℃、反应时间为4 h条件下制备的银纳米颗粒产量最高,这种银纳米颗粒粒径小、分散均匀、不易团聚。第二章 银纳米颗粒的生物相容性研究[目的]深入阐明橙汁提取物生物制备的银纳米颗粒的生物相容性。[方法]通过CCK-8试剂盒、扫描电镜和抑菌实验评价银纳米颗粒的生物相容性及抗菌性。通过CCK-8试剂盒检测制备的银纳米颗粒对SD乳鼠背部皮肤成纤维细胞在酶标仪中的吸光度;通过扫描电镜观察制备的银纳米颗粒处理过的红细胞的形态变化;通过酶标仪检测孔板中银纳米颗粒处理的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的吸光度变化。[结果]浓度介于6.25-50 μg/ml的银纳米颗粒对大鼠皮肤成纤维细胞和红细胞均没有毒性作用。在12.5μg/mL及以上浓度银纳米颗粒对大肠杆菌具有明显的抑制作用,100μg/mL及以下浓度银纳米颗粒对金葡菌未见明显抑制作用。[结论]此种方法制备的银纳米颗粒在良好的生物相容性浓度范围,还具有特异的抗菌性。