三叶青是新“浙八味”重点培育品种,是一味清热解毒中药,尚未被中国药典收载,《浙江省中药炮制规范(2015)》在定量检测指标方面只有醇溶性浸出物检测一项,没有任何其它药效成分定量控制指标,无法对不同三叶青药材进行精准、深入系统的质量评价和质量控制。鉴于此,本研究拟建立更加精准和系统的三叶青多维指纹图谱和糖谱检测方法,并对不同产地、不同炮制加工方式、不同采收年限的三叶青药材进行质量评价研究,为三叶青药材品质形成过程、选择适宜产区和合理炮制加工方式等提供更加精准的质量评价方法和技术依据。主要结果如下:(1)采用HPLC-DAD-ELSD法以及PMP柱前衍生化-HPLC法分别建立了三叶青多维指纹图谱以及单糖HPLC指纹图谱,经方法学验证,方法稳定可靠,可用于品质评价研究。(2)对10个不同产地三叶青中的活性成分含量进行测定,结果发现总黄酮和多酚以都匀的含量最高,其含量为37.909 mg/g和11.251 mg/g,遂昌的次之,其含量分别为32.025 mg/g和10.275 mg/g;多糖含量以遂昌最高,含量为35.586 mg/g。通过多维指纹图谱和化学计量学分析可知,不同产地三叶青成分含量差异较大,其中都匀和遂昌的三叶青药材样品主成分因子综合得分较高,质量相较于其他产地较好。对三叶青单糖进行分析测定,得到所有三叶青多糖均由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、氨基葡萄糖8种单糖组成,其中甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖4种单糖含量最高,为三叶青多糖中的主要组成成分,以葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖含量为指标进行分析可知,遂昌三叶青的整体含量要高于其他产地。(3)通过对不同加工方式三叶青进行活性成分含量,多维指纹图谱和多糖糖谱三方面的分析可知,鲜品的综合含量最高,分别为33.919 mg/g、9.641 mg/g、37.543 mg/g,冻干三叶青中活性成分含量与鲜品最为接近;经主成分分析可知,其中鲜品的主成分因子综合得分最高,冷冻干燥的得分次之,以及鲜品和冷冻干燥的单糖含量最高。(4)通过测定不同年限三叶青的总黄酮、总多酚及总多糖含量,发现人工栽培的三叶青中活性成分含量随着年份的增加而升高,且都在第4年时达到最高,其含量分别为37.503 mg/g、12.629 mg/g和45.653 mg/g。通过比较不同年限的多维指纹图谱可以发现,4年生三叶青的两类图谱中无论是数量还是含量均为所有年限中最佳的。对三叶青多糖中单糖含量测定后可知在第4年时整体含量达到最高。综上所述,本研究所建立的多维指纹图谱及糖谱法完善了三叶青质量评价标准,并且通过研究得到人工种植的三叶青最佳产地和生长年限为遂昌4年生三叶青,最适加工方式为冷冻干燥。