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目的:作为主要的上皮源性因子,白细胞介素-33（IL-33）和胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）均能诱导和促进Th2型免疫反应,在过敏性呼吸道疾病的发病机制中发挥作用。IL-33/ST2L和TSLP/OX40L通路同样在过敏性疾病的发生发展中起到重要作用,但关于两者之间是否存在交互作用尚未证实。本研究通过动物实验,上调和抑制变应性鼻炎大鼠模型中的IL-33蛋白水平,观察变应性鼻炎大鼠的鼻粘膜炎症性改变,鼻粘膜上皮及血清中TSLP的表达改变,观察2型免疫反应中的细胞因子（IL-4、IL-5、Tim-1）的表达情况。方法:通过OVA全身致敏和局部激发Wistar大鼠,制备变应性大鼠模型。设立（1）NS组（生理盐水对照组）;（2）OVA组;（3）IL-33+OVA组;（4）Anti-IL33+OVA组。收集大鼠鼻腔粘膜上皮及外周血清,采用苏木精-伊红染色（HE）方法观察气道炎症细胞浸润,嗜酸性粒细胞分泌等变化。免疫组化法（IHC）观察大鼠鼻粘膜上皮中IL-33、ST2、TSLP的表达。采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血液上清中Th2型细胞因子（IL-4、IL-5、Tim-1）和IL-33、TSLP及小鼠卵清蛋白特异性Ig E（OVA-s Ig E）蛋白产生水平。同时应用差速壁贴方法以及限定条件的培养基,培养大鼠鼻粘膜上皮细胞,以供后续实验中应用。结果:1.变应性鼻炎大鼠模型鼻粘膜HE染色显示粘膜下血管和腺体增多,粘膜的纤毛结构脱落;同时粘膜层及粘膜下层伴有嗜酸性粒细胞浸润;OVA变应性鼻炎大鼠和IL-33+OVA变应性鼻炎大鼠鼻粘膜上皮中可见明显嗜酸性粒细胞浸润,鼻粘膜上皮纤毛脱落和倒伏。2.TSLP免疫组化产物位于鼻粘膜上皮的表层和固有层中;IL-33在鼻粘膜上皮细胞的细胞质和细胞核中均有表达;ST2同样在鼻粘膜上皮细胞胞质中表达;与对照组比较,实验组中IL-33、ST2和TSLP的表达均有升高。2.与空白组对比,血清中OVA特异性Ig E及TSLP、IL-33、IL-4、IL-5、Tim-1TH2型细胞因子表达显著增加。3.抑制IL-33对ST2和TSLP的表达有抑制作用。结论:1.变应性鼻炎大鼠血清及鼻粘膜上皮组织中大量表达TH2型细胞因子,IL-33、ST2和TSLP参与了变应性鼻炎发病过程;2.IL-33、TSLP、ST2在鼠鼻粘膜上皮细胞细胞质中表达,抑制IL-33可下调ST2、TSLP的表达,IL-33/ST2和TSLP可能存在正协同关系。目的:以正常大鼠鼻粘膜上皮细胞和变应性鼻炎大鼠鼻粘膜上皮细胞（Rat nasal epithelial cells,RNEp Cs）为基础,构建正常大鼠RNEp Cs和变应性鼻炎大鼠RNEp Cs常氧和缺氧细胞模型,并运用慢病毒转染方法构建TSLP基因敲减细胞模型,研究IL-33/ST2信号通路与TSLP在鼻粘膜上皮细胞中的相互作用,并进一步研究低氧环境条件下两者在变应性鼻炎中的相互效应。方法:培养变应性鼻炎大鼠鼻粘膜上皮细胞,构建常氧和低氧细胞模型;培养正常大鼠鼻粘膜上皮细胞,构建Anti-IL-33（IL-33抑制模型）和TSLP敲减细胞模型。随机分组:常氧对照组（Normoxia,N）、常氧TSLP敲减组（TSLP knock down）、常氧+Anti-IL-33组、常氧变应性鼻炎组（ARS）、低氧变应性鼻炎组（Hypoxia,H-ARS）。常氧条件:21%O2,5%CO2,74%N2,37℃;低氧条件:5%O2,5%CO2,90%N2,37℃。免疫组织化学染色法鉴定细胞;CCK-8染色法检测细胞增值性;荧光TUNEL法检测各组鼻粘膜上皮细胞凋亡情况;Transwell法检测各组在不同浓度IL-33（0,5,10,20ug/ml）下影响鼻粘膜细胞迁移的效果。ELISA法检测各组鼻粘膜上皮细胞上清液中IL-33分泌量;Western blot法检测各组鼻粘膜细胞的IL-33、TSLP、ST2蛋白表达。结果:1.细胞生长情况:原代鼻粘膜上皮细胞呈圆形或椭圆形,有丰富突起;免疫化学染色AE1/AE3呈阳性;2.细胞增殖活性差异（CCK-8）:与常氧对照组（N）比较,ARS组和H-ARS组鼻粘膜上皮细胞增殖增加,H-ARS表现更显著;Anti-IL-33和TSLP-KD干预后鼻粘膜上皮细胞增殖受到抑制;组间差异具有统计学意义（p值<0.05）;随着IL-33浓度增加（0,5,10,20μg/ml）,各组细胞均呈增殖趋势,其中低氧组更显著（p值<0.01）。3.细胞凋亡差异（TUNEL）:与常氧对照组比较,Anti-IL-33组和TSLP-KD组细胞凋亡面积率增加;而ARS组和H-ARS组抑制了细胞凋亡,两者之间的差异显著（p值<0.01）。4.细胞迁移情况（Transwell小室）:与常氧对照组比较,Anti-IL-33组显著抑制了细胞迁移（p值<0.01）,而H-ARS组则明显促进了细胞迁移（p值<0.01）;在不同浓度梯度的IL-33作用下,TSLP-KD组和H-ARS组细胞迁移有量效关系。5.各组细胞上清液分泌IL-33测定结果（Elisa）:与常氧组对照,IL-33在ARS和H-ARS组分泌量增加（p值<0.01）;各组在不同时间内IL-33的分泌量随着时间延长均有升高,而无论常氧或低氧TSLP-KD组,IL-33在前18小时的分泌量增加不显著,随后有明显升高;24H的IL-33分泌量与18H相比,有显著差异（p值<0.01）。6.各组细胞内源性IL-33、ST2和TSLP蛋白表达情况（Western blot）:H-ARS组和ARS组三者蛋白表达量均有增加,Anti-IL-33组和TSLP-KD组三者表达受抑制（p值<0.05,p值<0.01）;H-ARS和ARS比较,低氧三者的表达（p值<0.05）。结论:1.IL-33、ST2和TSLP大量存在于变应性鼻炎鼻粘膜上皮细胞中;2.TSLP和IL-33/ST2信号通路之间存在正协同效应。3.TSLP和IL-33之间的正反馈作用抑制力了鼻粘膜上皮细胞的凋亡;促进了鼻粘膜上皮细胞的增殖和迁移。4.低氧条件下,变应性鼻炎鼻粘膜上皮细胞的炎症性反应更显著;在治疗中有效改善鼻粘膜上皮细胞的局部缺氧环境,抑制低氧相关性信号通路蛋白的表达,亦或成为治疗变应性鼻炎的新思路。