和肠饮对溃疡性结肠炎大鼠NLRP3、NLRP6炎性小体信号通路的影响

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目的:研究导师经验方和肠饮对溃疡性结肠炎模型大鼠的NLRP3、NLRP6炎性小体信号通路的影响并探讨其可能的作用机制。方法:60只健康雄性SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组、美沙拉嗪(5-SA)治疗组、和肠饮高、中、低剂量治疗组,每组10只,除正常组外,其余5组均建立2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobene sulfonicacid,TNBS)诱导的UC大鼠模型,用药干预后,观察疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分(HPS)。通过病理观察大鼠结肠损害的变化,免疫组化法检测结肠组织NLRP3、NLRP6、ASC和caspase-1的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测 NLRP3、NLRP6、ASC 和 caspase-1 mRNA 的表达,ELISA 法检测血清IL-1β、IL-18含量。结果:1.各组大鼠DAI评分表明,与正常组大鼠比较,模型组大鼠DAI评分明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型组大鼠比较,和肠饮高剂量组和西药组大鼠DAI评分明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),和肠饮低、中剂量组大鼠DAI评分也较模型组降低,差异具有统计学意义(P<0.05);各治疗组之间DAI评分差异无统计学意义(P>0.05)。2.各组大鼠结肠组织病理学评分显示,与正常组大鼠比较,模型组大鼠结肠组织病理学评分明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型组大鼠比较,和肠饮中、高剂量组和西药组大鼠结肠组织病理学评分降低,且差异具有统计学意义(P<0.05),和肠饮低剂量组大鼠结肠组织病理学评分也较模型组降低,但是差异无统计学意义(P>0.05);各治疗组之间结肠组织病理学评分差异无统计学意义(P>0.05)。3.IL-1β的表达情况:与正常组大鼠比较,模型组大鼠血清IL-1β含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01),与模型组大鼠比较,和肠饮低、中剂量组和西药组大鼠血清IL-1β含量下降,且差异具有统计学意义(P<0.05),和肠饮高剂量组大鼠血清IL-1β含量明显下降,且差异具有统计学意义(P<0.01),各治疗组之间血清IL-1β含量差异无统计学意义(P>0.05)。4.IL-18的表达情况:与正常组大鼠比较,模型组大鼠血清IL-18含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01),与模型组大鼠比较,和肠饮低、中、高剂量组和西药组大鼠血清IL-18含量明显下降,且差异具有统计学意义(P<0.01),各治疗组之间血清IL-18含量差异无统计学意义(P>0.05)。5.Caspase-1 mRNA的表达情况:与正常组大鼠比较,模型组大鼠结肠组织Caspase-1 mRNA表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05),与模型组大鼠比较,和肠饮中、高剂量组和西药组大鼠结肠组织Caspase-1 mRNA表达下降,且差异具有统计学意义(P<0.05),和肠饮低剂量组大鼠Caspase-1 mRNA表达与模型组比较也有下降,但差异无统计学意义(P>0.05),各治疗组之间Caspase-1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。6.ASC mRNA的表达情况:与正常组大鼠比较,模型组大鼠结肠组织ASC mRNA表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05),与模型组大鼠比较,和肠饮低、中、高剂量组和西药组大鼠结肠组织ASC mRNA表达下降,且差异具有统计学意义(P<0.05),各治疗组之间ASC mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。7.NLRP3 mRNA的表达情况:与正常组大鼠比较,模型组大鼠结肠组织NLRP3 mRNA表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01),与模型组大鼠比较,和肠饮高剂量组和西药组大鼠结肠组织NLRP3 mRNA表达明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01),和肠饮中剂量组NLRP3 mRNA表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05),和肠饮低剂量组大鼠NLRP3 mRNA表达与模型组比较也有下降,但差异无统计学意义(P>0.05),各治疗组之间NLRP3 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。8.NLRP6 mRNA与正常组大鼠比较,模型组大鼠结肠组织NLRP6 mRNA表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)与模型组大鼠比较,和肠饮高剂量组和西药组大鼠结肠组织NLRP6 mRNA表达明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01),和肠饮中剂量组NLRP6 mRNA表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05),和肠饮低剂量组大鼠NLRP6 mRNA表达与模型组比较也有下降,但差异无统计学意义(P>0.05),各治疗组之间NLRP6 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.和肠饮能改善溃疡性结肠炎模型大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分(HPS)。2.和肠饮能下调NLRP3、NLRP6、ASC和caspase-1蛋白的表达以及NLRP3、NLRP6、ASC和caspase-1 mRNA的表达,并能下调血清IL-1β、IL-18 含量。3.和肠饮可能通过抑制NLRP3、NLRP6炎性小体信号通路,下调IL-1β、IL-18的表达,减轻对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜的损害。
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