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前言 在肿瘤的侵袭和转移过程中，蛋白酶和蛋白酶抑制剂起着重要作用。蛋白酶能降解细胞外基质，而蛋白酶抑制剂具有阻断这一过程的能力。新近发现的丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)超级家族的一个成员—maspin，在乳腺癌和前列腺癌等多种肿瘤中已被证明具有肿瘤抑制活性。已有的研究表明，maspin通过阻断肿瘤细胞的迁移和增殖，抑制侵袭和转移过程。 Maspin在大多数人类组织中有不同程度的表达，而在肿瘤进展过程中多表现为下调。近来有报道，maspin具有抑制血管生成的作用，它能够阻断在体和离体血管的生成，进而降低肿瘤的微血管密度以及抑制肿瘤生成。有新的证据表明，maspin与p53肿瘤抑制途径相互作用，在部分肿瘤中，maspin的表达与突变型p53的水平负相关，这表明在体内，maspin可能是p53的靶基因。Maspin蛋白在乳腺、前列腺、结肠和口腔鳞状上皮等正常组织中高表达，而在相应的肿瘤组织中表达下调，并与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移、局部复发或肿瘤进展、生存期短以及突变型p53蛋白阳性等因素相关。这与其具有的肿瘤抑制功能是一致的。但也有研究表明，maspin蛋白在胰腺癌和卵巢癌中异常高表达，即在正常组织中不表达或低表达，而在相应的癌组织中表达上调。关于maspin在胃癌中的表达有两种截然相反的报道。Maass等在6个胃癌细胞系中没有检测到maspin的mRNA。而Son等发现肠上皮化生区和胃腺癌的maspin蛋白表达明显高于非癌黏膜，并与mRNA的表达一致。关于maspin在胃癌中的表达情况迄今仅有数篇报道，而且至今未见关于胃癌中maspin与p53表达相关性的研究。本研究采用免疫组织化学方法检测maspin蛋白与突变型p53蛋白的表达，分析maspin蛋白表达与胃癌的病理分型、分期、淋巴结转移等临床病理特征的关系及其与突变型p53蛋白表达的相关性，旨在探讨其在胃癌发生发展中的生物学意义及相关分子病理学机制。材料与方法 1.临床病例资料收集中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所和辽宁省肿瘤医院存档胃癌石蜡标本共巧6例，其中105例有远癌正常砧膜，106例有肠上皮化生。156例标本中肠型胃癌45例，弥漫型胃癌111例;乳头状腺癌20例，高分化管状腺癌2例，中分化腺癌23例，低分化腺癌74例，未分化癌9例，印戒细胞癌21例，粘液腺癌6例，类癌1例;早期胃癌32例，中期胃癌28例，晚期胃癌96例;有淋巴结转移的106例，无淋巴结转移的50例。所有患者术前均未做化疗、放疗，有完整的临床资料和随访资料。中位年龄49岁(30一80岁)。 2.实验方法和结果判定采用免疫组织化学方法(Pv一久X均二步法)检测上述胃癌标本中maspin蛋白(鼠抗人maspin单克隆抗体，工作浓度1:50，Novocastra公司)与突变型户3蛋白(鼠抗人户3多克隆抗体，工作浓度1:100，夺med公司)的表达。Maspin蛋白以胞核或胞浆中出现清晰的棕黄色颗粒为阳性染色;突变型P53蛋白以胞核中出现清晰的棕黄色颗粒为阳性染色。采用半定量积分法判定结果，每张切片随机选5个高倍视野观察，计数100个细胞，阳性细胞数蕊5%为O分，6%一25%为1分，26%一50%为2分，51%一75%为3分，>75%为4分;阳性强度黄色为1分，棕黄色为2分互棕褐色为3分，积分相乘，O一1分为阴性(一);2一6分为阳性(+);8一12分为强阳性(++)。将(+)、(++)归为表达阳性组计算阳性率。 3.统计分析采用sPssl2.0软件包进行扩检验、sp既止man等级相关检验和单因素生存分析。结果 105例远癌正常胃豁膜均未见~pin蛋白表达。而106例肠上皮化生中，maspin蛋白表达阳性率为95.3%(101/100)，其中强阳性表达者占75.5%(80/106)，阳性表达者占19.8%(21/106)。156例胃癌中，皿旧pm蛋白表达阳性率为51 .3%(80/156)，其中强阳性表达者占26.9%(42/156)，阳性表达者占24.4%(38/156)。Maspin蛋白位于细胞的胞浆和胞核。经比较，maspin蛋白在肠上皮化生(95 .3%)和胃癌组织(5 1 .3%)中的表达显著高于远癌正常胃薪膜(0.0%)中的表达(P<0.001)。Maspin蛋白在胃癌组织中的表达，相对于正常胃薪膜为高表达(P<0.001)，相对于肠上皮化生组织则为表达下调(P<0.001)。 肠型胃癌和弥漫型胃癌中maspin蛋白表达的阳性率分别为55 .6%(25辫5)和49 .5%(.55/1 11)，二者无统计学差异(p>0 .05)。不同组织学类型中，msPin蛋白的阳性表达率在粘液腺癌中最高，为66 .7%(4/6)，其次为中分化腺癌56.5%(13/23)，未分化癌55.6%(5/9)，乳头状腺癌55%(11/20)，印戒细胞癌52.4%(11/21)，高分化管状腺癌50%(1/2)，低分化腺癌47.3%(35刀4)，类癌1例无表达，各组织学类型胃癌之间maspin蛋白的表达无显著差异(P>0.05)。Maspin蛋白在早期胃癌、中期胃癌和晚期胃癌中表达的阳性率分别为56.3%(18/32)、39.3%(l一/25)和53.1%(51/96)，各期胃癌中maspin的表达无显著差异(P>0.05)。有淋巴结转移组中，maspin蛋白表达的阳性率为48 .1%(51/l06)，无淋巴结转移组阳性率为58%(29/5O)，二者无显著差异(P>O，05)。KaPlan一Meier生存曲线可见，~pin蛋白阴性表达组5年总生存率(40%)高于maspin蛋白阳性表达组(38.6%