【摘 要】
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CpG基序(CpG motifs)是指一类以非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)为核心的序列。CpG DNA可以使Thl类抗原特异性抗体的水平提高,并加速抗原特异性的CTL反应。CpG可分为A、
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CpG基序(CpG motifs)是指一类以非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)为核心的序列。CpG DNA可以使Thl类抗原特异性抗体的水平提高,并加速抗原特异性的CTL反应。CpG可分为A、B、C三种类型,其中C型CpG兼有A、B型的优点,且具有多个人类免疫刺激序列。将具有免疫刺激作用的CpG序列插入到质粒载体骨架合适的位置上,可以提高质粒DNA编码蛋白的免疫原性。本实验室前期构建了表达肿瘤相关抗原MUCI和Survivin融合蛋白(以下简称MS)的DNA疫苗VR-MS(以VR1012为载体)和重组腺病毒疫苗AD-MS。研究显示,用表达IL-2的VR-IL-2作为佐剂共免疫,并采用DNA prime-rAD boost的免疫方案,在小鼠体内能够有效地产生特异性细胞免疫和体液免疫反应,并且对模型小鼠具有较好的免疫治疗效果。为了进一步提高肿瘤基因疫苗的免疫原性,本论文在VR-MS疫苗载体骨架上插入16个重复的C型CpG免疫刺激序列,构建基因疫苗CpVR-MS,考察加入CpG是否能提高疫苗的免疫效果及安全性。为了提高肿瘤基因疫苗的安全性、降低制备成本,构建表达MS和IL-2的双顺反子载体疫苗DV-IL-2-MS,并与VR-MS／VR-IL-2共免疫形式对比,考察双顺反子载体疫苗的免疫效果和安全性。结果显示,与VR-MS/VR-IL-2共免疫形式相比,加入CpG DNA佐剂能明显增强疫苗的体液免疫和细胞免疫水平,并且疫苗的抗肿瘤作用也有了一定的提高。双顺反子载体疫苗DV-IL-2-MS,没有起到对VR-MS/VR-IL-2共免疫形式的优化作用,其免疫反应和抗肿瘤作用没有达到VR-MS/VR-IL-2的水平。
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