丝黑穗病和矮花叶病是玉米生产上的两种主要病害,在世界主要玉米产区几乎均有发生,给玉米产量和质量造成了巨大的损失。目前,利用玉米本身的抗源,选育优良玉米抗病品种是防治玉米丝黑穗病和矮花叶病发生的最经济有效的措施,因此建立一种快速、简便的抗病基因检测方法对玉米抗病育种具有重要意义。本研究目的是以玉米抗丝黑穗病基因ZmWAK和抗矮花叶病基因ZmTrxh为研究对象,应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测玉米抗病基因表达蛋白的方法。通过在大肠杆菌中高效表达和纯化上述两种玉米抗病基因,以重组抗病蛋白作为免疫原免疫小鼠和家兔,利用杂交瘤细胞技术生产鉴定了特异识别重组抗病蛋白的单克隆抗体,制备了兔源多克隆抗体,为建立玉米抗病蛋白检测方法奠定了良好研究基础。本研究的主要结果如下:(1)克隆了玉米抗丝黑穗病基因ZmWAK与抗矮花叶病基因ZmTrxh,并构建了原核表达载体。(2)建立了玉米重组抗病蛋白的原核表达、鉴定以及纯化条件。(3)用纯化的重组抗病蛋白分别免疫BALB/c小鼠和新西兰大白兔,获得ZmWAK蛋白与ZmTrxh蛋白的鼠源与兔源多克隆抗血清,并进行免疫学特性鉴定,获得了较好的效价。(4)利用杂交瘤细胞技术将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,以阻断ELISA方法进行筛选阳性克隆,通过连续亚克隆,获得稳定分泌ZmWAK重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株4株,分别命名为4C3-G8,5F7-E2,5F7-H3,7F4-C5。