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神经干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞，影响其增殖和分化的因素多且复杂;它可以增殖并分化成有功能的神经元，为治疗各种神经退行性疾病提供可能。神经干细胞来源及数量有限，寻找有效促进神经干细胞增殖分化的方法至关重要。相对于细胞因子，小分子化合物具有易于调控、来源丰富、成本较低等优点。成体海马神经发生依赖于成体神经干细胞的增殖和分化，它和海马相关的学习记忆能力密切相关。筛选能有效调控神经干细胞增殖分化的小分子化合物具有重要意义。 利用实验室已经建立的，基于只在中枢神经系统中特异表达的Nestin启动子的双荧光报告平台，通过平台筛选得到影响Nestin启动子活性的小分子化合物。将筛选得到的喹唑啉类化合物作用于原代培养的胚胎神经干细胞，用免疫组化和凝胶电泳的方法，检测候选化合物对神经干细胞增殖及分化的影响。筛选出Yhhu-3477使神经元的标志性蛋白Tuj-1表达增加，促进神经干细胞向神经元分化。同时，BrdU掺入实验检测神经干细胞的增殖，发现Yhhu-3792使BrdU阳性细胞数明显增加，表明Yhhu-3792促进神经干细胞增殖。 采用免疫凝胶电泳检测Yhhu-3477和Yhhu-3792的作用机制，发现Yhhu-3477可以使Wnt3a蛋白表达增加，并使β-catenin入核增加，说明Yhhu-3477激活了Wnt/β-catenin信号通路，表明Yhhu-3477促进神经干细胞向神经元分化可能和Wnt/β-catenin信号通路相关。免疫凝胶电泳的方法检测Yhhu-3792对Notch、SHH和Wnt信号通路的影响，结果发现Yhhu-3792使Notch1受体表达增加，说明Yhhu-3792促进神经干细胞增殖可能和Notch信号通路相关。鉴于Yhhu-3477的毒性较高，选取Yhhu-3792进行进一步深入研究。 为了验证Yhhu-3792促进神经干细胞增殖，用神经干细胞球实验来验证这一结果，Yhhu-3792使神经干细胞球的数量和直径明显增加。进一步研究其作用的机制，尤其是对Notch信号通路的作用。发现Yhhu-3792不仅使Notch1受体，并且使其配体DLL1、Jagged2表达增加，促进Notch1受体剪切片段NICD入核，进一步证实了Yhhu-3792激活了Notch信号通路。用实时定量荧光PCR和染色质免疫共沉淀的方法，检测Yhhu-3792对Notch下游目标基因表达的影响，发现Yhhu-3792使Notch下游基因Hes3和Hes5的转录水平明显增加。用染色质免疫共沉淀的方法，发现在Yhhu-3792的作用下，NICD与Hes3和Hes5基因启动子序列的结合增加，验证了实时定量荧光PCR的结果。Notch信号通路的抑制剂DAPT，可以抑制Yhhu-3792对Notch信号通路的激活和对神经干细胞的促增殖作用，证明了Yhhu-3792确实是通过激活Notch信号通路促进神经干细胞的增殖。 将Yhhu-3792作用于成年C57BL/6小鼠，给药三周发现Yhhu-3792能够促进小鼠海马齿状回神经干细胞增殖，并且能够促进海马神经发生。通过Morris水迷宫和关联条件恐惧行为实验，发现Yhhu-3792能够提高小鼠的学习记忆能力。 综上所述，筛选出了两个影响神经干细胞增殖分化的小分子化合物，并初步探索了其可能的作用机制。发现化合物Yhhu-3477促进神经干细胞向神经元分化，并且激活了Wnt信号通路。化合物Yhhu-3792能够剂量依赖地促进神经干细胞增殖，进一步研究其作用机制，发现Yhhu-3792通过激活Notch信号通路促进胚胎神经干细胞增殖，且Yhhu-3792促进成年海马神经干细胞增殖、成体神经发生以及小鼠学习记忆。这对于治疗海马相关的认知功能障碍具有重要的意义。