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猪瘟(Classicalswinefever，CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的猪的高度接触性传染病，严重危害养猪业的发展。在20世纪60年代，我国猪瘟兔化弱毒疫苗问世并推广应用，有效地控制了猪瘟的大流行。近来年，猪瘟的流行和发病特点发生了重要变化，出现了非典型猪瘟、温和型猪瘟，给猪瘟的防制、临床诊断和免疫监测带来一些新的难题。部分原因是猪瘟兔化弱毒疫苗长期高强度的免疫，已使CSFV野毒株及兔化弱毒抗原发生了变异，导致有些地区发生疫苗免疫失败现象。近年来许多学者利用生物分子技术，正在开展猪瘟新型疫苗的研究，并探索其疫苗效果。 本研究对某猪场发生疑似猪瘟的疫情，通过流行病学调查、临床诊断、病理剖检变化、金标卡检测、免疫荧光抗体试验、兔体交互试验、回归动物实验的基础上诊断猪瘟，然后根据GenBank登录的猪瘟病毒shimen和C株的E2基因序列设计一对特异引物，采摘病死猪的血液、扁桃体、淋巴结、脾、肾等组织提取总RNA，进行RT-PCR扩增，将扩增产物测序后进行核苷酸序列比较分析。结果表明：该流行毒株是猪瘟病毒，与猪瘟病毒shimen和C毒株核苷酸的同源性分别为98.9％和94.9％。 在上述实验基础上，选用pMD18-T载体，通过对目的DNA的纯化、连接和转化，构建了pMD18-T-E2重组质粒，抽提重组质粒pMD18-T-E2，经双酶切鉴定纯化后，将E2基因分别连接到pcDNA3.1(-)和pET-32a(+)表达载体上并转化感受态细胞，挑取阳性克隆，经酶切和测序，成功构建了猪瘟病毒贵州毒株原核表达质粒pET32a-E2和真核表达质粒pcDNA3.1-E2。 将构建好的原核表达质粒pET32a-E2，转化至宿主菌BL21中，诱导表达目的蛋白，表达产物做SDS-PAGE电泳、Western-blot分析，得到了约58kDa左右条带，与预期大小相符，表明猪瘟E2基因在大肠杆菌中进行了高效表达，并具有一定的生物学活性。进一步提取、纯化目的蛋白，将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠，免疫后采血检测抗体，结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生了一定抗体水平，该研究对猪瘟亚单位疫苗的研究奠定了基础。