第一部分 细胞凋亡相关基因在喉鳞癌中的表达概况 目的 了解凋亡相关基因在喉鳞状细胞癌中的表达概况,探寻其在喉鳞癌及正常喉组织中的表达差异及意义。方法 提取喉鳞癌及癌旁正常喉组织的总RNA,采用Ampolablaleing-LRP方法,分别将上述提取的RNA合成生物素标记的cDNA探针。将合成的探针与细胞凋亡GEArray Q芯片膜(96个凋亡相关基因)进行杂交。采用化学发光方法,并用X感光片记录喉鳞癌标本和对照标本的基因信号表达强弱。将X光片感光点转化成TIFF图形文件,使用ScanAlyze和GEArray Analyzer软件进行资料分析。结果 利用基因芯片杂交筛选的方法,在所分析的与凋亡相关的96个基因中,Survivin、Bcl-2、TNF-b/Lta、TNFa等23个基因在喉鳞癌组织中表达上调;Bak、Bax、Bik、P53等22个基因表达下调。结论 通过细胞凋亡GEArray Q芯片膜杂交筛查的方法发现,在喉鳞癌中抑制凋亡的基因表达上调,促进凋亡的基因表达下调,这些基因改变组成了喉鳞癌特异的与凋亡相关的基因表达谱,为全面系统地研究喉鳞癌中与凋亡相关基因表达情况,及探讨喉鳞癌的发病机制提供了有益的线索。 第二部分 喉鳞癌组织中Bak、Bax和Bcl-2、Survivin基因蛋白的表达 目的 探讨促凋亡基因Bak、Bax在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)中的表达及其与凋亡抑制基因Bcl-2、Survivin之间的关系。方法 采用免疫组织化学染色方法检测45例原发性喉鳞癌(primary laryngeal squanmous cell carcinoma,PLSCC)及10例正常喉黏膜(normal laryngeal tissues,NLT)石蜡标本组织中Bak、Bax和Bcl-2、Survivin蛋白的表达。结果 Bak、Bcl-2和Bax、Survivin