VIP在烟曲霉菌感染角膜中的表达及作用

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目的:研究血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)在易感型C57BL/6小鼠和抵抗型BALB/c小鼠烟曲霉菌感染角膜中的表达,明确VIP在BALB/c小鼠烟曲霉菌感染性角膜炎中的作用。方法:(1)实验用抵抗型BALB/c及易感型C57BL/6两种类型的小鼠。用烟曲霉菌感染小鼠角膜,建立小鼠真菌性角膜炎动物模型,采用RT-PCR技术方法检测两种小鼠正常角膜和烟曲霉菌感染后分别于第1天、3天、5天角膜中VIP m RNA的表达情况。(2)选用抵抗型BALB/c小鼠作为接下来实验用的动物模型。给予BALB/c小鼠VIP拮抗剂预处理,用可拍照的裂隙灯显微镜定期观察小鼠角膜感染情况,分别于感染的第1天,3天和第5天根据小鼠角膜的感染情况进行临床评分。利用RT-PCR技术检测预处理前后正常角膜和感染后第3天小鼠角膜中促炎细胞因子MIP-2、IL-1β、TNF-α以及抗炎细胞因子IL-10、TGF-βm RNA的表达;利用ELISA技术检测小鼠正常角膜和烟曲霉菌感染后第3天及第5天角膜中促炎因子MIP-2、IL-1β、TNF-α蛋白和抗炎细胞因子IL-10及TGF-β蛋白的表达情况。结果:(1)BALB/c小鼠角膜在烟曲霉菌感染后第1天和第3天VIP m RNA的表达明显高于C57BL/6小鼠烟曲霉菌感染角膜中的表达,而在烟曲霉菌感染角膜后的第5天,两种类型小鼠的角膜中VIP m RNA的表达未见明显差异。正常两种小鼠角膜中也可见VIP的表达。(2)BALB/c小鼠经VIP拮抗剂处理后,与PBS处理对照组相比,VIP拮抗剂预处理小鼠角膜,在烟曲霉菌感染后的第3天和第5天可以增加小鼠角膜中炎症细胞因子MIP-2、IL-1β、TNF-αm RNA及蛋白质的表达,明显降低小鼠角膜中抗炎细胞因子IL-10、TGF-βm RNA及蛋白质的表达水平。BALB/c小鼠角膜的炎症反应加重,真菌感染性角膜炎的临床评分升高。结论:(1)烟曲霉菌感染性角膜炎中,抵抗型BALB/c小鼠VIP的表达明显高于易感型C57BL/6小鼠的表达。(2)VIP拮抗剂处理加重BALB/c小鼠角膜炎症反应。(3)VIP通过降低促炎因子表达和增加抗炎因子表达来减轻烟曲霉菌感染性角膜炎的炎症反应程度。
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